人白细胞介素13重组蛋白(rhIL-13)表达载体的构建及其在大肠杆菌的表达

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该文报道了hIL-13重组蛋白(hIL-13)表达载体的构建及其在大肠杆菌的表达.使用淋 巴细胞离液及密度梯度离心法从抗凝全血中分离人外周血单个细胞(PBMC),培养于含10﹪青霉素/链霉素、10﹪新生小牛血清的RPMI-1640培养基中,在80ng/mlPHA和10ng/mlConA丝裂 原刺激下培养24小时后,提取非粘附贴壁生长PBMC总RNA.利用引物设计与分析软件Primer Premier和DNASis辅助设计与分析巢式RT-PCR引物,外引物对分别命名为H1/H2和P1/P2,分 别扩增hIL-13全长cDNA序列中71-565和117-452 cDN,AP1/P2扩增目的片段为hIL-13成熟蛋 白编码基因.
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