维生素A及其衍生物广泛应用于化妆品、营养保健和皮肤性治疗药物等领域,具有维持视网膜的正常功能、抗炎、抗氧化和调节免疫等多种疗效作用。维生素A衍生物相比维生素A具有更佳的稳定性,尤其是维生素A酯中的维生素A棕榈酸酯是维生素A系列中应用最广泛的。目前,国内外主要通过化学合成法制备维A衍生物,不仅能耗高、污染严重,而且会产生同分异构体。因此,建立一条反应条件温和且选择性高的酶法生产维生素A衍生物的绿色生产工艺具有重要的意义。本论文以纺织布作为载体,分别采用吸附法和共价结合法固定化脂肪酶。确定了吸附法固定化最佳条件为:在35℃条件下,以棉-1为载体,1:7的质量体积比与活化剂混合,固定化体系的酶液浓度为19.75 g/L,固定化时间为5 h,所得固定化脂肪酶比酶活为760μmol/L/min/g;共价结合法固定化最佳条件为:以棉-1为载体,NaI04浓度为0.3 mol/L,在离子强度为10 mmol/L含脂肪酶2.08 g/L的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(pH 5.0)中固定化1 h,所得固定化脂肪酶比酶活为 915 μmol/L/min/g。研究了利用共价结合法固定化的脂肪酶催化合成维生素A棕榈酸酯,确定了最佳催化转酯反应条件:在30℃和180 rpm的条件下,以正己烷作为反应体系,维生素A醋酸酯与棕榈酸的浓度分别为10 g/L和46.8 g/L,固定化酶的用量为30 g/L体系,催化转酯化反应6 h,转化率可达87%;同时考察了固定化脂肪酶以维生素A醋酸酯为底物时,催化转酯化反应对脂肪酸的底物谱,结果显示其不仅对长链脂肪酸具有较高的转酯化能力,而且对短链脂肪酸也有较好的催化转酯作用;最后研究该固定化脂肪酶在催化合成维A棕榈酸酷反应中的反应动力学,结果表明该催化反应属于双底物乒乓机制,动力学参数分别为:Vma,72.464 μmol/min/g;,0.210 mol/L;KmB,0.202 mol/L。对脂肪酶利用维A醋酸酯作为底物催化合成维生素A棕榈酸酯的体系分离纯化作了研究。确定了维生素A棕榈酸酯的液-液萃取条件:萃取体系为乙醇/水和正己烷,乙醇浓度80%,乙醇/水与正己烷的体积比为3:1,萃取温度-20℃,萃取级数为5次,最终维生素A棕榈酸酯质量分数达到96.4%。萃取后,利用硅胶柱层析进一步纯化,条件为:反应液1 mL上硅胶柱层析(硅胶200～300目,柱20×280 mm),流动相为乙酸乙酯/石油醚(1:9,V/V),流速为68.5mL/h,维生素A醋酸酯和维生素A棕榈酸酯可经硅胶柱层析可以完全分离。