苦荞是寥科荞麦属双子叶植物,含丰富的多酚化合物,具有多种药理活性,如预防高血压,降血糖、降血脂和抗衰老等作用。研究指出,苦荞的多种药理作用和其抗氧化活性有关,苦荞发芽后,抗氧化活性显著增加,但苦荞芽的高抗氧化性对机体的保护作用及保护机制尚未阐明。为此,本研究在分析苦荞芽多酚物质含量和抗氧化活性的基础上,通过建立双氧水（H₂O₂）和丙烯酰胺（Ala）细胞氧化损伤模型,考察了苦荞芽乙醇提取物（TBSE）对氧化损伤细胞中主要抗氧化酶活性及蛋白表达的影响,探讨该影响与Nrf2-ARE信号通路的关系,以阐明苦荞芽乙醇提取物对细胞氧化损伤的抵抗作用及其机制,为扩宽荞麦产品的利用途径提供依据。主要研究结果如下:1.高效液相色谱结果表明,苦荞芽乙醇提取物主要含有6种酚类物质,分别为绿原酸、咖啡酸、丁香酸、芦丁、阿魏酸和槲皮素。苦荞芽乙醇提取物具备一定的醌氧化还原酶诱导活性与胞内抗氧化能力。2.苦荞芽乙醇提取物对H202介导HepG2细胞氧化损伤具有一定的抵抗作用。采用MTT比色法筛选出无细胞毒性的提取物作用浓度为5μg/mL、10 μg/mL、20μ1g/mL,阳性对照槲皮素作用浓度为2.5μM、5μM、10μM,H202氧化损伤浓度为400μM。相比于空白组,H202氧化损伤组的细胞存活率显著降低,而经过苦荞芽乙醇提取物和槲皮素预处理24h后,细胞存活率显著上升。3.苦荞芽乙醇提取物能有效降低H₂O₂介导的HepG2细胞ROS水平,维持线粒体膜电位的稳定并保护细胞免受H202诱导的凋亡。H202可诱导MDA含量升高,降低SOD、CAT和GST酶活性,而苦荞芽乙醇提取物对此有抵抗作用。通过Western Blot试验可知,苦荞芽乙醇提取物预处理能上调H202处理的HepG2细胞中抗氧化酶NQO1和HO-1的表达及促进Nrf2的核转移。4.苦荞芽乙醇提取物对丙烯酰胺（A1a）诱导的Hepa1c1c7细胞氧化损伤具有抵抗作用。MTT结果显示,提取物作用浓度为5 μg/mL、10 μg/mL、20μg/mL,阳性对照槲皮素作用浓度为5μM、10 μM、20μM,对细胞无毒性,Ala氧化损伤浓度为10 mM。与空白组相比,Ala氧化损伤组的细胞存活率显著降低,而经过苦荞芽乙醇提取物和槲皮素预处理24h后,细胞存活率得到升高。5.苦荞芽乙醇提取物能减少Ala诱导的Hepalclc 7细胞ROS水平,并维持线粒体膜电位的稳定。苦荞芽乙醇提取物可抵抗Ala诱导的Hepalclc 7细胞MDA含量升高和SOD、CAT和GST酶活性降低。Western Blot结果显示,苦荞芽乙醇提取物上调了 Hepalclc 7氧化损伤细胞抗氧化酶NQO1和HO-1的表达及Nrf2的核转移。综上所述,苦荞芽乙醇提取物具有显著的抗氧化作用,对细胞所受氧化损伤有一定的抵抗作用,其抵抗机制与Nrf2-ARE信号通路中Nrf2的核转移有关。