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第一部分 CHAF1A和PCNA在宫颈癌中的表达及临床意义 目的: 探讨CHAF1A和PCNA在CSCC组织中的表达和临床意义。 方法: 荧光定量PCR检测宫颈鳞癌和对应癌旁组织中CHAF1A和PCNA的mRNA的水平,免疫组织化学染色法检测正常宫颈上皮、CIN以及CSCC组织中CHAF1A和PCNA蛋白的表达,分析其与临床病理参数的关系,并探讨相关性。 结果: CHAF1A和PCNA在CIN及CSCC组织中表达明显高于正常宫颈组织,CHAF1A和PCNA呈正相关。CHAF1A与CSCC的分化程度、肿瘤大小、浸润深度及有HPV感染有关,PCNA与CSCC的分化程度、FIGO分期、淋巴结转移、浸润深度及有HPV感染有关。 结论: CHAF1A和PCNA在CSCC中高表达并且与恶性程度相关,二者呈正相关。CHAF1A的表达水平与宫颈鳞癌病人预后有关。 第二部分 CHAF1A对宫颈癌细胞生物学行为的影响 目的: 探讨CHAF1A基因表达对宫颈鳞癌细胞的增殖、迁移和凋亡影响。 方法: 通过qRT-PCR和western blot检测在不同宫颈癌细胞株和正常人永生化表皮细胞株中CHAF1A的表达情况。干扰CHAF1A内源性表达,MTT实验检测细胞增殖,流式细胞技术检测细胞凋亡及细胞周期变化,划痕实验检测细胞迁移能力的改变,western blot检测增殖凋亡相关因子和细胞周期相关因子表达情况。 结果: CHAF1A在宫颈癌细胞中高表达,shCHAF1A组细胞的增殖和迁移相比NC组降低,凋亡比例增加,同时G1期向S期转化细胞数减少。 结论: CHAF1A表达水平降低使细胞增殖能力和迁移能力受到抑制,促进了细胞的凋亡。