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棉花是一种重要的经济作物和油料作物,组织培养技术对于棉花基因功能的鉴定和生物工程育种是至关重要的,但大多数棉花品种难以通过组织培养得到再生苗,因而对于如何高效获得棉花再生苗的研究显得尤为重要。许多研究表明WUSCHEL(WUS)基因不仅在植物体胚发生的过程中发挥重要作用,还能调控芽分生组织和花分生组织的形成。本研究从陆地棉中分离并克隆了两个GhWUS基因,并将其与SRDX的融合抑制子转化中棉所24(中24,陆地棉品种)来分析了GhWUS在棉花体细胞胚胎发生中的作用,再通过将该基因的诱导型表达载体转化拟南芥进而分析了该基因在植物体胚发生和芽再生的过程中的影响,得到了以下实验结果:1.GhWUS影响棉花体胚发生。首先,通过qRT-PCR检测了GhWUS基因的的表达谱,其结果显示GhWUS在胚状体阶段的表达量较高,而在根、茎、叶中的表达量较低。其次,将GhWUS与一个抑制结构域SRDX融合形成一个嵌合的GhWUS抑制转录因子并将其转化中棉所24,发现该嵌合的抑制子能够显著抑制棉花愈伤组织向胚性愈伤组织的转变。2.诱导表达GhWUS促使拟南芥幼苗根尖形成胚状体和芽我们构建了GhWUS的pER8诱导型表达载体并将其转化拟南芥,发现在拟南芥中诱导GhWUS表达后其根尖能够形成叶状结构和胚状体结构并且其体胚发生相关基因和芽再生相关基因的表达量上升。3.GhWUS诱导拟南芥的离体根形成芽并与生长素协同诱导其形成胚状体我们利用转基因拟南芥的根外植体进行芽再生实验,发现根外植体不经历CIM的预培养阶段也能在含诱导剂的SIM中形成芽。其次,在有生长素的作用下,诱导表达的GhWUS能够促使在MS培养基中培养的离体根形成胚状体和不定芽。并且在没有添加外源激素的MS培养基中诱导GhWUS表达还是能促使离体根形成不定芽。