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目的探讨跨膜蛋白16A(TMEM16A)对高肺血流性肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞周期的调控作用。方法将30只体重在180g-200g的正常SD大鼠,随机分为对照组、假手术组和分流组。分流组使用腹主动脉-下腔静脉造瘘分流法建立左向右分流的高肺血流性肺动脉高压大鼠模型,假手术组除腹主动脉夹闭3分钟和不进行血管穿刺吻合缝合外,其余同分流组方法处理,对照组不做任何处理,3组大鼠在相同环境中饲养11周。术后第11周末分别测定3组SD大鼠右心室压力(RVP)、心肌肥厚指数(RVHI)、肺组织切片HE染色和腹部B超等证实建模是否成功。分别取3组SD大鼠肺动脉平滑肌组织(2-4级血管)进行原代肺动脉平滑肌细胞培养。以慢病毒为载体,采用siRNA技术沉默TMEM16A基因。流式细胞技术检测细胞周期,Westren Blot检测细胞周期蛋白cyclin D、CDK2、p27KIP和cyclin E的表达。结果1、模型成功建立:分流组SD大鼠右心室压力(RVP)较对照组和假手术组明显升高,分流组SD大鼠心肌肥厚指数(RVHI)较对照组和假手术组明显增大,肺组织切片HE染色提示分流组SD大鼠肺动脉较对照组和假手术组明显增厚,腹部B超亦提示分流组SD大鼠造瘘口处血液存在明显的动静脉分流。2、TMEM16A的表达:分流组SD大鼠TMEM16A在肺动脉平滑肌细胞中的表达较对照组和假手术组明显升高,而假手术组与对照组比较TMEM16A表达未见明显差异。3、各实验组周期蛋白表达及周期比例:与对照组比较,分流组大鼠平滑肌细胞G0/G1期比例显著下降(P<0.05),S期+M/G2期、cyclin D1和cyclin E的蛋白表达显著升高(P<0.05)。慢病毒干扰组大鼠平滑肌细胞G0/G1期比例较空载病毒组和分流组均显著增加(P<0.05),S期+M/G2期、cyclin D1和cyclin E的蛋白表达均较空载病毒组和分流组显著降低(P<0.05),CDK2蛋白和p27KIP蛋白在各组的表达无明显差异(P>0.05)。结论在高肺血流性肺动脉高压大鼠模型中,肺动脉平滑肌细胞内TMEM16A蛋白表达显著升高,导致cyclin D1和cyclin E表达升高,进一步促进细胞周期由G1期向S期的转换,从而增强肺动脉平滑肌细胞增殖能力,增强肺动脉重构,可能是高肺血流性肺动脉高压发病机制其中之一。