奶山羊黄体弥散性神经内分泌细胞标志物的表达特点

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为了研究山羊卵巢中是否存在弥散性神经内分泌系统(DNES)细胞及其分布情况,采用了敏感性较高的免疫组化链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶法、超微结构观察及计算机图象分析等方法对妊娠中期奶山羊卵巢黄体中弥散性神经内分泌细胞标志物的分布进行了研究。结果显示:一些黄体细胞胞质中含有5-羟色胺(5-HT)、S-100蛋白、神经特异性烯醇化酶(NSE)、突触素(SYP)免疫反应阳性物质。神经特异性烯醇化酶(NSE)、突触素(SYP)、5-羟色胺(5-HT)、S-100蛋白均为弥散性神经内分泌系统光谱的,共同的细胞标记物。根据免疫反应复合物呈色的程度不同可分为强阳性、中等阳性、弱阳性三种。这些细胞散在或成团分布,多呈圆形、卵圆形或三角形,一些细胞具有明显的突起。在电镜下观察,一些细胞含有分泌颗粒,分泌颗粒散在分布于胞浆内,它们形态不一、大小不等,直径约100-500nm,有的细胞内的颗粒含有明显的核心和晕轮,上述结果表明,山羊卵巢黄体中的这些细胞属DNES细胞。山羊黄体中DNES细胞所含的S-100蛋白、5-HT、NSE和SYP在非黄体细胞中未检测到。结果提示:这些物质与黄体的形成及退化有极为密切的关系为了探讨5-羟色胺(5-HT)、S-100蛋白、神经特异性烯醇化酶(NSE)和突触素(SYP)四种弥散性神经内分泌细胞标志物是否在黄体的同一细胞中共存,本实验采用免疫荧光双标记法结合激光扫描共聚焦显微镜观察对四种弥散性神经内分泌细胞标志物的分布进行了检测。结果显示:在妊娠中期奶山羊卵巢黄体细胞中,首次观察到了S-100蛋白和SYP有共同存在于一个细胞的现象。且SYP和S-100蛋白共存的细胞主要分布在黄体周边,少数散布于中央区域。S-100与5-HT和5-HT与SYP共存的细胞均匀分布于整个黄体中。阳性反应主要出现于大黄体细胞,但在黄体被膜下方及小梁两侧等小黄体细胞聚集区域也可见一定数量的阳性细胞。在激光扫描共聚焦显微镜下观察,可看到细胞背景色为黑色,单标记阳性反应的组织细胞胞质为深浅不等的红色或绿色,双阳性细胞胞质为深浅不等的黄色。S-100蛋白与NSE、S-100与5-HT、S-100与SYP、NSE与5-HT、NSE与SYP、5-HT与SYP免疫阳性细胞轮廓清楚,胞质中含有深浅不等黄色的染色颗粒,细胞核不着色,呈圆形点状,核位于细胞中央或偏于一侧。细胞形态有圆形、卵圆形、长梭形、三角形等。结果提示:属于弥散性神经内分泌细胞的黄体细胞,必然存在不同的类型,它们分泌的产物和行驶的功能不同。
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