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目的观察实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmuneencephalomyelitis,EAE)大鼠侧脑室周围髓鞘相关轴突再生抑制因子Nogo-A以及其受体NgR表达的时程变化,探讨Nogo-A和NgR在EAE发生发展中的作用。方法用豚鼠脊髓匀浆(guinea pig spinal cord homogenate,GPSCH)、完全福氏佐剂(complete freund’s adjuvant,CFA)、百日咳疫苗原浆液(pertussis vaccine,PV)致敏雌性Wistar大鼠,建立EAE模型。65只雌性Wistar大鼠随机分成3组:正常对照组5只,完全弗氏佐剂组30只,EAE组(GPSCH+CFA+PV)30只,各组再随机分成6个亚组,每个亚组5只。正常对照组在第11天全部处死,EAE组和CFA组的6个亚组分别在抗原免疫后的第11天、第13天、第15天、第18天、第24天和第30天处死。观察各组大鼠发病、体重变化情况并进行神经功能评分。取大鼠脑组织切片进行检测:用苏木素—伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色后在光镜下进行炎性病灶计数;坚牢蓝-焦油紫染色法光镜下观察脱髓鞘情况。免疫组化方法和阳性细胞数计数检测各组大鼠侧脑室周围组织内Nogo-A和NgR的表达情况。对Nogo-A和NgR与神经功能评分、炎性病灶数进行相关性分析。统计学分析采用SPSS16.0软件包进行。结果1.各组大鼠EAE的发病结果:正常对照组和完全弗氏佐剂组无大鼠发病。EAE组共有26只大鼠发病发病率为86.66%。2.各组大鼠神经功能评分、体重损失、CNS的HE和LFB染色病理结果:正常组、CFA组大鼠神经功能评分为0分,CFA组无体重损失。相对于CFA组,EAE组体重损失随病情的加重而增加,在第15天体重损失最明显。EAE组大鼠神经功能评分于第15天最为明显。正常对照组和CFA组大鼠侧脑室周围白质HE染色无炎性病灶。EAE组在第11天时CNS已出现炎性病灶,第13天、15天时炎性病灶范围扩大、数目增加,此时EAE组LFB染色可见典型的脱髓鞘改变。第24天时炎性病灶减少、程度减轻,第30天已接近正常组。3.各组大鼠侧脑室周围白质的Nogo-A免疫组化及图像分析结果:与正常对照组和同期CFA组比较,EAE组第11天亚组侧脑室周围Nogo-A的表达水平升高(P＜0.05)、第13组反而下降(P＜0.05)、15天、18天、24天、30天亚组组表达升高(P＜0.05),并于24天达到峰值。CFA各亚组侧脑室周围Nogo-A的表达水平与正常组相比差异无显著性(p＞0.05),CFA各亚组Nogo-A的表达水平组间比较差异无显著性(p＞0.05)。4.各组大鼠侧脑室周围白质的NgR免疫组化及图像分析结果:与正常对照组和同期CFA组侧脑室周围NgR的表达水平相比,EAE组第11天亚组表达水平无改变(p＞0.05),第13天、15天、18天亚组表达水平升高(P＜0.05),第24天和30天亚组表达水平回落,差异无显著性(p＞0.05)。CFA各亚组侧脑室周围NgR的表达水平与正常组相比差异无显著性(p＞0.05),CFA各亚组NgR的表达水平组间比较差异无显著性(p＞0.05)5.Nogo-A的表达水平与NgR的表达水平、神经功能评分、侧脑室周围炎性病灶数无相关性,NgR的表达与神经功能评分正相关(相关系数0.43)、与侧脑室周围炎性病灶数正相关(相关系数0.437)。结论1.Nogo-A升高贯穿于EAE病程多个时间点,可能与EAE早期的神经元轴突破坏,以及神经元轴突在恢复期再生抑制有关。2.NgR在EAE中期升高,可能与早期的轴突损害以及炎症细胞粘附、移行有关,在EAE病程后期NgR升高不明显,可能存在其他受体介导了EAE后期Nogo-A的轴突抑制作用。