优选后精子形态、DNA完整性对IVF-ET结局的影响

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研究目的:探讨优选后精子形态、DNA完整性对IVF-ET结局的影响。研究方法:选取2013年1月1日至2014年12月31日期间于宁波市妇女儿童医院生殖内分泌科因单纯输卵管性不孕接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的不育夫妇605例,女方年龄20-40岁,男方年龄24-40岁,取卵日在制备授精精子的同时,分别采用快速染色法(Diff-Quik),豌豆凝集素-异硫氰酸荧光素染色法(PSA-FITC)和精子染色质扩散实验(SCD),完成制备前和授精剩余精子形态、顶体形态和DNA完整性检测。分析优选前后精子畸形指数(SDI)、顶体异常率(AAR)和DNA碎片指数(DFI)水平的差异,与IVF受精失败(受精率<25%)的相关性,与临床妊娠失败的相关性,分析优选后SDI,DFI与IVF结局的相关性。结果:优选前 SDI,AAR,DFI 水平分别为 1.39±0.38,(11.95±5.79)%,(11.66±6.73)%,优选后 SDI,AAR,DFI(OSDI,OAAR,ODFI)水平分别为 1.25±0.26,(8.36±5.43)%,(9.65±5.60)%,差异有统计学意义(P<0.05)。SDI,AAR,DFI与精子前向运动率(PR)均呈负相关,r分别为-0.25,-0.22,-0.27,P均<0.05,优选后SDI,AAR,DFI与 PR均呈负相关,r 分别为-0.36,-0.38,-0.45,P 均<0.05。受精正常组 SDI,AAR,DFI,OSDI,OAAR 和 ODFI 水平分别为 1.35±0.23,(11.14±3.34)%,(10.78±3.99)%,1.21±0.20,(7.75±22.28)%和(8.67±3.17)%,受精失败组 SDI,AAR,DFI,OSDI,OAAR 和 ODFI 水平分别为 1.55±0.28,(16.71±3.64)%,(17.03±4.53)%,1.37±0.15,(12.05±3.06)%和(14.42±4.03)%,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic分析显示,SDI,AAR,DFI,OSDI,OAAR和ODFI均是IVF受精失败的危险因素,OR分别为1.48,1.83,1.55,2.28,11.29和3.27,P均<0.01。Logistic方程建立联合预测因子(JP)和优选后联合预测因子(OJP)。SDI,AAR,DFI,JP,OSDI,OAAR,ODFI 和 OJP 的 ROC 曲线下面积(AUC)分别为 0.629±0.036,0.774±0.034,0.703±0.032,0.816±0.030,0.699±0.034,0.893±0.020,0.806±0.024 和 0.925±0.018。根据约登指数得出 OSDI,OAAR 和 ODFI的预测阈值分别约为1.30,10%和15%。临床妊娠组移植优质胚胎数,SDI,DFI,OSDI和ODFI水平分别为1.92±0.28,1.36±0.11,(9.30±4.22)%,1.24±0.18 和(7.44±3.35)%,临床妊娠失败组移植优质胚胎数,SDI,DFI,OSDI 和 ODFI 水平分别为 1.75±0.50,1.58±0.10,(15.91 ±3.69)%,1.32±0.17和(12.25±4.14)%,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic分析显示,移植优质胚胎数,SDI,DFI,OSDI和ODFI均是IVF临床妊娠失败的影响因素,OR分别为0.54,1.28,1.41,1.66和2.98,P均<0.01。DFI,OSDI,ODFI与移植优质胚胎数呈负相关,r分别为-0.18,-0.31,-0.66,P均<0.01。SDI与移植优质胚胎数无显著相关性,r为-0.03,P>0.05。SDI,DFI,OSDI和ODFI的 ROC 曲线下面积 AUC 分别为 0.626±0.034,0.709±0.029,0.691±0.032 和0.835±0.022。根据约登指数得出OSDI,ODFI的预测阈值分别约为1.30,10%。根据ODFI相应阈值分为<5%,(5-10)%,(10-15)%,≥15%4组。受精率、卵裂率、优质胚胎率、种植率、临床妊娠率、早期自然流产率、活产率各组差异有统计学意义(P<0.05),多胎妊娠率、早产率、低出生体重率各组差异无统计学意义(P>0.05)。根据OSD1相应阈值分为<1.30,≥1.30 2组。受精率、优质胚胎率、种植率、临床妊娠率两组差异有统计学意义(P<0.05),卵裂率、早期自然流产率、多胎妊娠率、早产率、活产率、低出生体重率两组差异无统计学意义(P>0.05)。OSDI,OAAR,ODFI与受精率均呈负相关,r分别为-0.24,-0.50,-0.32,P均<0.01。ODFI与卵裂率、优质胚胎率、临床妊娠率、活产率均呈负相关,r分别为-0.23,-0.41,-0.20,-0.09,P 分别为<0.01,<0.01,<0.01,<0.01,=0.04;与早期自然流产率呈正相关,r= 0.23,P<0.01;与多胎妊娠率、早产率、低出生体重率无显著相关性,r分别为-0.01,0.04,0.03,P分别为0.83,0.54,0.62。OSDI与优质胚胎率呈负相关,r=-0.17,P<0.01,与ODFI呈正相关,r=0.32,P<0.01。结论:优选后精子形态、DNA完整性明显改善,与IVF受精潜能密切相关,尤其以顶体形态关系最为密切,联合预测价值更佳。优选后精子DNA完整性显著影响胚胎发育和临床妊娠结局,优选后精子形态与胚胎发育、临床妊娠相关,但预测效能较低。两者与早产和低出生体重等远期结局的相关性尚需深入研究。
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