目的肺炎克雷伯菌是一类引起院内感染的常见条件致病菌。Rcs系统是肺炎克雷伯菌中一个重要的转录调控系统,可参与调控肺炎克雷伯菌中多种毒力因子的转录,如荚膜多糖相关基因。本研究从NTUH-2044全基因组中筛选出7个与荚膜多糖相关的候选基因(rmpA、manB、wcaJ、wcaI、wcaG、gmd、magA),旨在探讨肺炎克雷伯菌转录调控子RcsAB与7个候选基因的转录调控关系。方法本实验室已经利用基因芯片技术,完成了在肺炎克雷伯菌NTUH-K2044全基因组中RcsA、RcsB、RcsAB靶基因的筛选,在此基础上,结合文献综述,共挑选了7个与荚膜多糖相关的候选基因(rmpA、manB、wcaJ、wcaI、wcaG、gmd、magA)为本实验的研究对象。使用RT-qPCR实验与基因芯片结果相对照,初步判断7个候选基因与RcsA、RcsB、RcsAB的正负调控关系;然后使用LacZ报告基因融合实验进一步确定RcsA、RcsB、RcsAB与7个候选基因的正负调控关系;再使用EMSA实验验证RcsAB与7个候选基因之间是否可以直接结合,以确定RcsAB与7个候选基因之间存在直接或间接的调控关系。结果1、RT-qPCR实验结果提示RcsB可能对manB、wcaG、magA起正调控作用;RcsA和RcsB可能对rmpA、wcaJ、wcaI、gmd起正调控作用。2、RT-qPCR实验结果与芯片结果存在一定差异,因此采用LacZ报告基因融合实验进行进一步确认,结果表明RcsB正调控manB、wcaJ、wcaG、magA的表达;RcsA和RcsB正调控rmpA、wcaI、gmd的表达。3、RcsAB与7个候选基因的EMSA实验结果均未发现明显结合阻滞带,表明RcsAB对7个候选基因的调控可能是间接调控关系。结论通过RT-qPCR实验、LacZ报告基因融合实验证明了转录调控子RcsB可能正调控manB、wcaJ、wcaG、magA的表达;RcsA和RcsB可能正调控rmpA、wcaI、gmd的表达。通过EMSA实验证明了RcsAB与这7个荚膜多糖相关基因之间可能存在间接调控关系。