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本课题探讨脐带血中多潜能成体祖细胞（MAPCs）的分离方法，优化MAPCs的培养条件。在此基础上研究MAPCs的生物学特性以及脐带血MAPCs的神经分化潜能，为今后将其应用于临床提供相关的基础理论和方法。 一、低血清条件下影响脐带血MAPCs分离的相关因素 利用足月妊娠健康产妇胎儿新鲜脐带血，分离脐带血单个核细胞（MNC），在低血清条件下进行体外培养。通过比较不同培养基、不同接种密度以及不同的首次换液时间对脐带血MAPCs生长的影响，研究低血清条件下从脐带血中分离MAPC的相关影响因素，探索优化培养条件，建立脐带血MAPCs的分离培养体系。结果表明，在低血清条件下，DMEM／F12培养基更适合于脐带血MAPC生长；1×106／cm2是原代培养的适宜接种密度，原代第72小时首次换液为最佳换液时问。脐带血的质量可能是影响分离效果的因素之一。利用所建立的人脐带血MAPCs的体外优化培养条件培养的细胞可于超过70％的脐带血中分离出MAPCs并在体外持续扩增，并具有良好的分化潜能。 二、MAPCs的生物学特性以及脐带血MAPCs的神经分化潜能 利用第一部分所建立的分离和培养体系，从新鲜脐带血中分离脐带血MAPCs，观察细胞生长特点、生长曲线、细胞周期、细胞表型分析、体外诱导分化实验以及检测其细胞因子的表达等。结果表明，73％的脐带血标本可以分离出MAPCs，细胞形态为长梭状，类似于成纤维细胞，90％以上细胞处于G0／G1期，可以传至8—10代以上而无形态学变化。细胞表面标志检测发现MAPCs高表达常用于识别人间充质干细胞的细胞标记CD29、CD44、CD90以及CD73、CD105等，低表达CD144、vWF和CD49d，不表达造血细胞标记CD34，CD45，CD14，CD3、HLA-DR、内皮细胞标记CD31和整合素CD11a，具有与脐带血来源MSC和USSCs类似的细胞免疫表型特征，而与PSC3445细胞存在明显差别。MAPCs在一定的诱导分化剂的作用下可向神经细胞、成骨和脂肪细胞分化，并能表达IL-6、SCF、FL和G-CSF等细胞因子。 结论：本研究探讨了低血清条件下从脐带血中分离MAPC的相关影响因素，通过优化培养条件，建立了脐带血MAPCs的分离培养体系。并利用这一体系从脐血中分离培养出MAPCs，研究了其生物学特性与多向分化潜能特别是神经分