核苷(酸)类似物治疗慢性乙型肝炎患者HBV逆转录酶区变异的研究

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研究背景抗病毒治疗是慢性乙型肝炎患者治疗的关键。目前除干扰素外,核苷(酸)类似物(NAs)广泛应用于抗乙肝病毒治疗。NAs口服给药、价格较低、抗病毒效果较好,但只能抑制病毒复制不能完全清除体内病毒。长期服用NAs可能导致患者对其耐药,使病情反复甚至加重。分析NAs长期治疗应答不佳的慢性乙型肝炎患者乙型肝炎病毒(HBV)逆转录酶区的变异位点、变异位点组合模式、HBV-DNA水平等方面的特点,具有重要的临床参考价值。目的分析核苷(酸)类似物治疗的慢性乙型肝炎患者HBV逆转录酶区耐药相关变异位点、变异位点组合模式、HBV DNA水平和HBeAg等特征,为临床应用核苷(酸)类似物抗乙肝病毒治疗提供参考。方法纳入研究的141例慢性乙型肝炎患者,使用NAs治疗的107个病例为治疗组,未使用药物抗病毒治疗的34个病例为对照组。采用线性探针反向杂交法(PCR-RLP)检测HBV逆转录酶区耐药相关变异位点,实时荧光定量PCR法检测乙型肝炎病毒DNA水平,酶联免疫吸附试验检测乙肝免疫标记物,并对耐药相关变异的特点和研究病例的临床资料进行统计学分析。结果核苷(酸)类似物治疗效果不佳组耐药相关变异检出率(82.5%)明显高于未治疗的对照组(5.9%)和抗病毒治疗有效组(有效组10个病例未检出耐药相关变异)(P<0.01)。97个核苷(酸)类似物抗病毒效果不佳的病例中80例检出140个耐药相关变异位点,包括rtM204I 45个、rtM204V 32个、rtA181V28个、rtL180M 25个、rtN236T 10个;变异位点组合模式主要有:rtL180M+rtM204I、rtM204V、rtM204I+rtM204V、rtA181V+rtM204V、rtM204I、rtA181V+rtN236T等;51个对NAs应答不佳病例耐药变异检出率70.59%,46个病毒学突破病例耐药变异检出率95.65%,差异明显(P<0.01)。NAs单药治疗病例早于多药治疗病例检出耐药相关位点(P<0.01);NAs治疗时间越长,耐药变异检出率越高(P<0.01);病例HBV-DNA水平等级越高,耐药变异检出率也越高(P<0.01)。结论1、NAs治疗慢性乙型肝炎可导致HBV逆转录酶区变异,NAs抗乙型肝炎病毒效果不佳与HBV逆转录酶区变异密切相关;2、不同NAs药物导致慢性乙肝患者HBV逆转录酶区变异位点、变异模式特点不同;3、NAs治疗慢性乙型肝炎的用药种类与方式、治疗时长,患者HBV-DNA水平等对HBV逆转录酶区发生耐药变异均可能产生重要影响。提示在NAs治疗前、治疗过程合适时间点检测NAs耐药相关变异位点和HBV DNA水平,可为临床慢性乙型肝炎的抗病毒治疗提供重要参考。
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