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本文通过对草莓果实发育成熟过程中磷脂酶D的代谢、调控及分子生物学研究,可为明确磷脂酶D在草莓果实发育成熟过程中的作用机理打下基础,从而有助于设计和提出减少细胞膜伤害、提高草莓采后品质、延长草莓采后储藏期的合适的采收、运输及储藏条件和新方法;与此同时,本研究也有助于了解在非跃变型果实草莓中磷脂酶D在信号传导过程中所起的作用。 本研究以草莓品种Aromas和Seascape为试材,对草莓果实不同发育时期磷脂酶D的活性变化、磷脂酶D的生化特性、活体条件下磷脂酶D的特性,磷脂酶D的亚细胞学定位及分子生物学特性等进行了初步研究。
利用RT-PCR及RACE技术从草莓果实中分离到了编码磷脂酶Dα基因的cDNA全长序列(GeneBank登录号为AY758359)。 二级结构分析认为草莓磷脂酶Dα含有C2结构域、磷脂酶D家族的活性结构域:HKD结构域、‘IYIENQYF’区域及其他与磷脂酶D功能调控相关的结构域。草莓磷脂酶DαC2结构域与磷脂酶Dβ和γ相比,在潜在的钙离子结合残基上发生的变化决定了草莓磷脂酶Dα与其他磷脂酶D类对钙离子亲和性的不同。研究结果表明草莓果实磷脂酶Dα是受多种因素调节的,在草莓果实中起主要作用的磷脂酶D类。