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在已建立的小鼠骨肉瘤FBJ细胞系中,FBJ—S1细胞具有低肿瘤转移性并富含神经节苷脂GD1a,而FBJ-LL细胞则是高肿瘤转移性并缺乏GD1a。迄今已证明存在于细胞膜表面的GD1a调控着FBJ细胞的肿瘤转移能力,如细胞运动性、与基质的粘着性、移植到小鼠体内后转移到肝脏的克隆数量等。为阐明GD1a在FBJ细胞中调控的特定的分子,用半定量PCR筛选了一系列肿瘤相关分子,发现GD1a参与正向调控两种肿瘤转化抑制基因——Caveolin-1和Stiml的表达。
对FBJ细胞肿瘤转移机制的深入探索发现,肿瘤坏死因子(帆)可增高FBJ细胞的运动性,提高细胞在无血清条件下的生存率并增加转录水平的TNFα和MMP-9产量。进一步研究证明TNFα在一系列FBJ细胞系中均与GD1a的含量成反比,GD1a在FBJ细胞中负调控TNFα的表达,Caveolin-1位于TNFα的上游并抑制TNFα的合成。而且,GD1a通过Caveolin-1在caveolae上和TNFR2结合抑制TNFα。使用特异性抑制剂以及siRNA技术,阐明了GD1a调节TNFα表达的细胞内信号途径:1)RhoB/Pkn1和Jak/Stat信号途径是必需的TNFα合成通路,并且GD1a抑制TNFα通过RhoB/Pkn1和Jak/Stat信号途径；2)MAPK-ERK信号途径与TNFα的合成无关,但转导了GD1a抑制TNFα的信号；3)MAPK-p38和JNK也参与TNFα的合成,但并不介导GD1a调控TNFα的信号通路。
RT—PCR结果揭示,在FBJ细胞中HGF的基因表达与GD1a的含量相反。GM2/GD2合成酶正义链cDNA转染FBJ—LL细胞升高GD1a的含量后,降低了HGF的表达；用GD1a合成酶St3ga12和St3ga15的siRNA共同转染细胞,成功抑制GD1a的合成后上调了HGF的水平。用siRNA沉默Pkn1导致HGF水平升高。在Caveolin-1 siRNA稳定转染的细胞内引入Caveolin-1正义链cDNA重新表达Caveolin-1后,将被Caveolin-1 siRNA上调的HGF的表达降低至原来的表达水平,表明GD1a通过Pkn1和Caveolin-1在小鼠FBJ细胞中调控HGF的表达。