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目的观察α-硫辛酸（alpha lipoic acid，ALA）对外源性H2O2对人视网膜色素上皮细胞表达血红素氧合酶（Heme oxygenase，HO）-1的影响，并探讨其分子机制。方法体外培养人视网膜色素上皮细胞系ARPE-19，并根据不同的实验目的分为6组：（1）空白对照组：仅给予等体积培养基；（2）H2O2干预组：ARPE-19细胞中加入终浓度为12.5mol/L H2O2作用30min；（3）ALA干预组：H2O2作用后加入10～30μmol/L ALA作用4～24h；（4）PI3K抑制剂组：在组3基础上加入25μmol/L LY294002作用30min；（5）siRNA干预组：采用特异性siRNA干扰Nrf2或HO-1表达，随后根部不同研究目的加入H2O2和（或）ALA；（6）CoPP或ZnPP干预组：在组3基础上加入10μmol/L CoPP或ZnPP作用3h。RT-PCR和Western blot分别检测HO-1mRNA和蛋白表达；流式细胞术检测ARPE-19细胞凋亡；荧光探针检测活性氧（reactive oxygen species，ROS）的产生；Westernblot检测Akt磷酸化及Nrf核转位。结果1. RT-PCR结果显示，阴性对照组HO-1mRNA和蛋白表达水平极低，12.5mol/LH2O2处理30min后，HO-1仅有轻微增高。不同浓度ALA孵育后，随着ALA剂量的增加，HO-1表达逐渐增多；2. H2O2作用ARPE-19细胞30min后，磷酸化Akt水平仅轻微增加。10～30μmol/LALA作用4h后，磷酸化Akt水平随着ALA浓度的增高而增加；3.阴性对照组ARPE-19细胞无Nrf2发生核转位。30μmol/L ALA作用后，细胞核内Nrf2含量显著增高。而同时给予25μmol/L PI3K抑制剂LY294002处理后，细胞核内Nrf2明显降低；4.采用siRNA干扰Nrf2表达后，与对照siRNA组相比，HO-1表达显著降低。5. H2O2处理可明显诱导ARPE-19细胞凋亡，并诱导其产生ROS。同时给予30μmol/L ALA处理后，细胞凋亡率和ROS分泌显著降低。ALA干预的同时给予HO-1抑制剂ZnPP处理后，细胞凋亡率和ROS上升至H2O2组水平；siRNA干扰HO-1表达后，细胞凋亡率、ROS水平与ZnPP处理组类似。而ALA联合HO-1激动剂CoPP处理，能进一步降低细胞凋亡率及ROS产生。结论ALA可能通过PI3K/Akt和Nrf2途径诱导视网膜色素上皮细胞表达HO-1，从而发挥对细胞的保护作用。