山西玉米大斑病菌生理小种鉴定及苗期抗性评价体系建立

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近年来,玉米大斑病(Northern corn leaf blight,NCLB)在山西省各产区频繁发生,严重影响了当地的玉米产量。目前防治玉米大斑病最经济有效的方法是选种抗病品种。由于玉米大斑病菌生理分化明显,小种变化复杂,而且毒性小种频率的上升容易导致抗病品种丧失抗性,所以明确山西省各玉米产区大斑病菌生理分化和遗传分化情况,对抗病品种的选育和该病害的有效防治具有重要的科学意义。此外,品种抗病性鉴定是抗病品种选育的一个关键环节,目前主要采用田间抗性鉴定,但其鉴定周期长、受环境影响大等因素,影响了品种抗性鉴定的科学性和准确性。因此,建立一种简便易行、快速准确,且受环境影响小的室内苗期抗病性鉴定方法,是目前玉米抗病性鉴定急需解决的一项技术难题。为此,本研究主要对山西玉米大斑病菌的生理小种、遗传多样性和室内苗期抗性鉴定方法进行了研究,旨在明确山西省玉米大斑病菌的生理小种种类、分布及其遗传分化情况,并初步建立玉米苗期抗性评价体系,为培育抗病品种、抗性鉴定和玉米大斑病的有效防治提供理论基础和科学依据。主要研究结果如下:1、山西省玉米大斑病菌生理小种种类及其分布本研究采用Ht单抗性基因鉴别寄主法,在2017~2018年采自山西省32个县市的玉米罹病叶片上分出185株玉米大斑病菌(Exserohilum turcicum),从中鉴定出0、1、2、3、N、12、13、1N、2N、3N、123、12N、13N、23N和123N,共15个生理小种。其中,123N为山西省优势小种,1、N、3N、23N和123N号为山西省主要致病群体。且不同地区小种分布情况总体表现为晋南地区>晋北地区>晋中地区,其中忻州最多,长治最少。185个菌株对Ht1、Ht2、Ht3和Ht N这4个Ht单抗性基因的毒力频率分别是51.89%,51.35%,51.89%和71.89%,对双抗性基因组合、三抗性基因组合和四抗性基因组合的毒力频率分别为69.73%、43.24%和16.22%。综上所述,山西省各地区玉米大斑病菌生理分化现象明显,不同地区小种分布情况也存在较大差异,4种Ht单抗性基因的抗病品种已不能有效的防治该病害的发生和危害。2、山西省玉米大斑病菌ISSR遗传多样性分析本试验利用优化后体系和程序,采用7条ISSR引物对山西省不同地区的24株玉米大斑病菌进行PCR扩增,结果显示,7条ISSR引物共扩增出89条条带,多态性为95.51%。24株玉米大斑病菌的遗传相似系数在0.326~0.955之间,平均遗传相似系数为0.725,以0.82划分为6个类群,说明山西省不同地区玉米大斑病菌间存在丰富的遗传多态性,且菌株多态性与菌株的地理来源无明显相关性,但与生理分化有一定关系。3、玉米苗期抗大斑病评价体系的建立本试验采用单因素分析法和苗期与田间鉴定结果吻合度分析法,对4种接种方法和3个苗期抗性评价指标进行对比分析,结果显示,菌饼法、棉花菌液法、喷雾法和涂抹法病情指数分别为40.00、52.59、62.92和86.67,其中,喷雾法病情指数相对较高且操作简单,无死苗现象,为最优苗期接种方法。病斑数、病斑面积和面积比3个评价标准的苗期鉴定结果与田间鉴定结果的吻合度分别为43.33%、60.00%和73.33%。其中,面积比评价标准的苗期鉴定结果与田间结果的吻合度最高,为最佳苗期抗性鉴定评价标准。因此,苗期抗性鉴定最优接种方法为喷雾法,最佳苗期评价标准体系指标为面积比。
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