本文以澳大利亚种源湿加松为试材,对其组织培养技术进行了系统研究,取2年生实生苗茎尖,通过腋芽诱导构建完整植株体系,研究了湿加松外植体消毒方法,基本培养基筛选,细胞分裂素6-BA、生长素NAA、IBA、蔗糖、光照强度、光照时间等外界因子对芽的诱导、增殖,伸长,以及生根的影响。主要结果如下:1.外植体消毒:从2年生实生苗采集嫩枝,选择无木质化带芽茎尖,将其剪成2cm左右,用清水冲洗5min,然后在超净工作台上,放2滴土温-20用无菌水冲洗2次,再用70%乙醇消毒10s,最后用0.1%HgCl2浸泡6.5min,消毒效果较好,无菌率达到89.2%。2.芽诱导:以GD+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+蔗糖2%为基本培养基,在光照时间12h·d -1,光强40μmol·m-2·s-1条件下培养,诱导率较高,芽的生长速度也较快。3.继代培养:继代培养以GD为基本培养基,随着继代次数的增加逐渐减少细胞分裂素6-BA浓度。最初继代,6-BA浓度1.0mg·L-1、0.5mg·L-1。然后6-BA浓度直接降到0.1mg·L-1,继代3-4次,芽的增殖系数可以达到4-5,培养期间无玻璃化和褐变现象。4.诱导生根:培养基、植物生长调节剂(NAA、IBA)对湿加松继代苗的诱导生根均有影响。以GD+蔗糖2%+IBA(0.1-0.3)mg·L-1为生根培养基,诱导效果较好,生根率可达45%。5.炼苗移栽:将诱导生根的组培苗,在自然光照下炼苗7d,然后移栽于草炭土和蛭石混合基质里(2:1=V/V),成活率可达80%,10d后苗高可伸长2cm。