长链非编码RNA分子HOXA-AS2介导的上皮性卵巢癌凋亡的机制研究

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[背景]上皮性卵巢癌(Epithelial ovarian cancer,EOC)发病隐匿,进展迅速,病人预后差。近年来研究发现,长链非编码RNA(Long noncoding RNA)在肿瘤的发生发展中起到重要的作用,但是其在卵巢肿瘤中的研究却很少。我们发现HOXA基因转录的HOXA-AS2长链非编码RNA在卵巢肿瘤中明显高表达,通过数据分析和表型实验证实HOXA-AS2能够抑制凋亡,促进肿瘤进展,因此研究HOXA-AS2的分子机制具有重要的临床意义。[目的]1.确定HOXA-AS2在上皮性卵巢癌中的表达水平。2.研究HOXA-AS2在卵巢肿瘤中凋亡和增殖的调节作用。3.研究HOXA-AS2调节卵巢肿瘤的分子机制。[方法]通过分析GEO数据库和临床样本得到HOXA-AS2在卵巢上皮性肿瘤中高表达。Kaplan-Meier分析模型研究HOXA-AS2对卵巢癌患者预后的影响。通过GSEA分析HOXA-AS2在卵巢肿瘤中的主要调控作用和影响的通路。CCK-8、平板克隆和Edu实验验证HOXA-AS2对于肿瘤增殖的影响,流式仪检测HOXA-AS2对于肿瘤细胞凋亡的影响。体内成瘤实验验证HOXA-AS2对于肿瘤增殖的影响。Western blot及免疫组化验证HOXA-AS2调控肿瘤的机制。[结果]1.Limma函数和qRT-PCR得到HOXA-AS2在上皮性卵巢癌中表达明显高于正常卵巢组织。卡方检验分析临床数据分析得到HOXA-AS2与FIGO分期和肿瘤大小明显相关。Kaplan-Meier分析得到HOXA-AS2的高表达的病人预后明显差。2.GSEA分析得到HOXA-A2主要参与细胞凋亡的调控,以及参与JAK-STAT通路的调控。3.CCK-8、平板克隆和Edu实验验证HOXA-AS2可以促进肿瘤增殖,流式仪检测HOXA-AS2明显抑制细胞的凋亡。体内实验同样证明HOXA-AS2可以促进肿瘤细胞的增殖。4.Western blot实验和免疫组化实验证实HOXA-AS2可以通过内外凋亡通路去调控细胞的凋亡。[结论]HOXA-AS2在卵巢肿瘤中明显高表达,抑制HOXA-AS2后可明显抑制卵巢肿瘤细胞的增殖能力,促进卵巢肿瘤细胞的凋亡。HOXA-AS2通过细胞的内外凋亡通路调控细胞的凋亡。综上所述,本研究证实了 HOXA-AS2参与卵巢肿瘤细胞凋亡的调控,为卵巢肿瘤的治疗提供了新靶点。
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