大蒜素同步热疗对宫颈癌Hela细胞增殖抑制作用机制的研究

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目的:探讨大蒜素同步热疗对宫颈癌Hela细胞增殖抑制作用的可能的机制的研究。方法:以宫颈癌Hela细胞为研究对象,0、20、50、80、100 μg/ml大蒜素作用Hela细胞,加热温度从37℃增高到38℃,加热时间为24小时,细胞体外实验分为MTT法检测大蒜素对Hela细胞的增殖抑制能力,具有时间-剂量的依赖性,流式细胞术PI双染法分析大蒜素同步热疗对宫颈癌Hela细胞有促凋亡作用;不同浓度的大蒜素作用与Hela细胞体外培养,荧光倒置显微镜观察细胞的形态学,Hoechst33258储存液或PI染色法后Hela细胞用荧光倒置显微镜观看细胞凋亡情况。RT-PCR测试0、20、50、80、100 μg/ml大蒜素作用Hela细胞加热温度从37℃增高到38℃,加热时间为24小时后测细胞基因P53、Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。结果:(1)大蒜素抑制Hela细胞的增殖用MTT法检测大蒜素作用Hela细胞24小时后细胞增殖抑制作用后呈现剂量依赖关系,0、20、50、80、100μg/ml不同剂量的大蒜素对Hela细胞的抑制作用,P<0.05差异有统计学意义。(2) 0、20、50、80、100 μg/ml大蒜素作用相同时间24小时后细胞随着作用浓度的增强,凋亡率增加,具有显著的统计学意义。(3)荧光倒置显微镜结果可以看出大蒜素作用Hela细胞胞质浓缩,染色质浓集,附于核膜下,Hoechst33258储存液或PI染色后出现大量的荧光,属于细胞凋亡表现。(4) 0、20、50、80、100μg/ml大蒜素作用Hela细胞相同时间24小时后细胞基因P53、Bcl-2、Bax表达的影响,RT-PCR结果显示,大蒜素作用后Hela细胞显示Bcl-2、Bax、p53上调,Bcl-2、Bax下调,可以显著促进肿瘤细胞的凋亡。结论:大蒜素同步热疗对宫颈癌Hela细胞有明显的促凋亡和增殖抑制
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