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植物C2H2锌指蛋白转录因子在生长发育、应答胁迫响应、植物激素信号调节等方面具有重要作用。拟南芥C2H2型转录因子AtYY1参与了植物抗逆性调控以及ABA信号传导。RNA结合蛋白作为真核细胞重要的转录后调控因子,在RNA代谢、植物生长发育、胁迫应答、植物激素信号传导以及可变剪接等过程中发挥重要作用。新近研究表明,拟南芥RNA结合蛋白RBM25在ABA介导的可变剪接及胁迫应答中发挥着重要功能,哺乳动物人类细胞YY1能够与RBM25相互作用,进而协同参与基因表达的调控。本研究以重要的粮食作物玉米为材料,利用生物信息学、生物化学和分子生物学技术,探讨了玉米中YY1与RBM25的相互作用关系及其可能的生物学功能,为进一步利用YY1和RBM25提高植物抗逆性奠定了基础。主要实验结果如下:1.利用生物信息学技术,通过氨基酸序列比对,鉴定了与拟南芥YY1高度保守的玉米同源基因ZmYY1和ZmYY2,以及与拟南芥RBM25高度保守的玉米同源基因ZmRBM25。氨基酸序列分析发现,ZmYY1和ZmYY2均含有五个重复串联的锌指蛋白结构域;ZmRBM25在N端含有一个识别单链RNA的RRM结构域,在C端含有一个结合RNA的PWI结构域。这些特征均符合该两类蛋白质的结构特点。2.利用DNA重组技术,构建了ZmYY1、ZmYY2和ZmRBM25酵母表达载体。酵母双杂交实验结果表明,转录因子ZmYY1和ZmYY2均与RNA结合蛋白ZmRBM25的C端结构域存在明显互作,但均不能与ZmRBM25的N端结构域发生互作。3.免疫共沉淀、荧光素酶互补实验和蛋白体外pull down实验结果进一步验证ZmYY1、ZmYY2与ZmRBM25的C端结构域互作。4.表达模式分析表明,ZmYY1在玉米幼苗的根、茎、叶等组织部位均有表达,且能够受ABA强烈诱导表达;亚细胞定位结果表明,ZmYY1和ZmYY2均定位于细胞核中,符合转录因子的定位模式。5.生物学功能分析结果表明,转ZmYY1、ZmYY2基因能显著提高酵母菌株对盐胁迫和干旱胁迫的耐受性;转录激活实验表明,ZmYY1和ZmYY2能正向调控ZmABR1基因的转录表达,且ZmRBM25能增强ZmYY1和ZmYY2对ZmABR1的转录调控。综上所述,玉米ZmYY1和ZmYY2转录因子能够与RNA结合蛋白ZmRBM25互作调控ZmABR1的表达,进而参与到ABA信号通路以及应答非生物胁迫反应,为玉米抗逆性遗传改良提供了重要信息。