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背景和目的:急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)是一种外科常见疾病,临床病理变化复杂,对治疗的反应也各不相同,轻型水肿型胰腺炎是一种自限性疾病,对治疗反应好,多数预后较好,而重症急性胰腺炎( severe acute pancreatitis,SAP)起病急、进展快,早期即可发生全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome,SIRS),虽然对SAP的治疗有了长足发展,但死亡率仍高达10~30%。SIRS被认为是导致患者死亡的主要原因。大量的研究已经证实SIRS时巨噬细胞清除凋亡中性粒细胞的吞噬能力下降,导致大量炎症介质释放加重了全身炎症反应。巨噬细胞膜上的CD50分子在巨噬细胞清除凋亡中性粒细胞过程中起着重要的调节作用,为巨噬细胞识别、清除凋亡中性粒细胞奠定基础。因此,研究SAP诱发的SIRS时巨噬细胞CD50的表达以及不同治疗对其表达的影响,对治疗SAP诱发的SIRS以及降低SAP的死亡率有重要意义。本实验旨在研究在SAP导致SIRS的大鼠模型中,应用中药茵陈承气汤、地塞米松及两者联合用药对腹腔巨噬细胞CD50蛋白表达水平的影响。方法:开腹经十二指肠乳头将1.5%去氧胆酸钠溶液逆行注入胰管制备大鼠SAP/SIRS(SAP/SIRS)的模型。75只SD大鼠随机分为假手术组(SO)、重症急性胰腺炎SIRS组、茵陈承气汤(YCCQT)治疗组、地塞米松(DEX)治疗组、中西医结合(ZXY)治疗组,茵陈承气汤治疗剂量为1ml/100g(灌胃),地塞米松治疗剂量为1mg/100g(腹腔内注射),各治疗组于造模后2小时和造模后12小时再次给药。造模24h后采集标本进行各项指标检测。光镜下观察各组胰腺标本病理改变,进行病理学评分;应用流式细胞技术检测各组腹腔巨噬细胞CD50阳性率;应用western blotting技术检测各组腹腔巨噬细胞CD50蛋白表达水平的差异;应用免疫荧光技术检测各组腹腔巨噬细胞CD50蛋白水平的差异。结果:1.各组大鼠胰腺标本病理改变:SI组与SO组比较,SI组病理改变明显(水肿:3.50±0.21 vs 0.290±0.05、炎症:2.90±0.15 vs 0、出血:2.10±0.18 vs 0、坏死:2.80±0.24 vs 0,P﹤0.01);各治疗组与SI组比较,均可见不同程度的改善,且具有统计学意义(P﹤0.05),尤以ZX组与SI组比较差异最显著(水肿:3.00±0.14 vs 3.50±0.21,P﹤0.05、炎症:1.40±0.23 vs 2.90±0.15、出血:0.40±0.15 vs 2.10±0.18、坏死:1.40±0.12 vs 2.80±0.24,P﹤0.01)。2.流式细胞仪检测各组大鼠巨噬细胞CD50表达阳性率:(1)与SO组比较,SI组巨噬细胞CD50阳性率明显下降,具有统计学意义(12.32±8.82% vs 36.52±12.61%,P﹤0.01);(2)与SI组比较,YC组巨噬细胞CD50阳性率略有增加(12.47±4.36% vs 12.32±8.82%,P﹤0.05),DE组巨噬细胞CD50阳性率明显增加(26.98±3.72% vs 12.32±8.82%,P﹤0.05),ZX组巨噬细胞CD50阳性率明显增加(35.35±5.74% vs 12.32±8.82%,P﹤0.01);(3)各治疗组间比较:ZX组与YC组、DE组比较,巨噬细胞CD50阳性率明显增加(35.35±5.74% vs 12.47±4.36% vs 26.98±3.72%,P﹤0.05)。3.Western Blotting检测各组大鼠巨噬细胞CD50蛋白表达的比较:(1)与SO组比较,SI组巨噬细胞CD50的表达有显著性差异(0.47±0.09 vs 0.76±0.15,P﹤0.01);(2)与SI组比较:YC组巨噬细胞CD50的表达水平有显著性差异(0.47±0.09 vs 0.55±0.08,P﹤0.05),DE组巨噬细胞CD50的表达水平有显著性差异(0.47±0.09 vs 0.56±0.11,P﹤0.05),而ZX组巨噬细胞CD50的表达有显著性差异(0.47±0.09 vs 0.71±0.13,P﹤0.01);(3)各治疗组间比较:ZX组与DE组、YC组比较,巨噬细胞CD50的水平表达有显著性差异(0.71±0.13 vs 0.56±0.11,0.71±0.13 vs 0.55±0.08,P﹤0.05);DE组与YC组比较,巨噬细胞CD50的表达显著性差异(0.56±0.11 vs 0.55±0.08,P<0.05)。4.免疫荧光技术检测各组大鼠巨噬细胞CD50蛋白表达的AU值比较:(1)与SO组比较,SI组巨噬细胞CD50的表达有显著性差异(235.44±21.35 vs 354.72±28.46,P﹤0.01);(2)与SI组比较:DE组巨噬细胞CD50的表达水平有显著性差异(235.44±21.35 vs 275.43±30.27,P﹤0.05),YC组巨噬细胞CD50的表达水平有差异(235.44±21.35 vs 267.39±25.36,P﹤0.05),而ZX组巨噬细胞CD50的表达有显著性差异(235.44±21.35 vs 305.52±31.14,P﹤0.01);(3)各治疗组间比较:ZX组与YC组、DE组比较,巨噬细胞CD50的水平表达有显著性差异(305.52±31.14 vs 267.39±25.36,305.52±31.14 vs 275.43±30.27,P﹤0.05);DE组与YC组比较,巨噬细胞CD50的表达存在差异(275.43±30.27 vs 267.39±25.36,P<0.05)。结论:与SO组比较,SI组大鼠胰腺病理改变较严重,各治疗组均有不同程度的改善,尤以ZX组效果最明显,说明单独应用中药茵陈承气汤或单独应用西药地塞米松对大鼠胰腺病理性改变效果不如中西药联合应用显著。SI组巨噬细胞CD50的表达水平明显下降,各治疗组均有不同程度提高,其中中西医结合治疗对巨噬细胞的CD50的蛋白表达水平提高的效果优于单独用药组,提示在SAP/SIRS模型中巨噬细胞的胞膜可能发生了改变,使巨噬细胞表面CD50大幅减少,影响了巨噬细胞与凋亡中性粒细胞的粘附、细胞间信号的传递,导致巨噬细胞清除凋亡中性粒细胞的吞噬功能下降,进一步引起大量中性粒细胞积聚于体内释放过多炎症介质加重炎症反应,从而使病情恶化。因此,中西医结合治疗可能是提高巨噬细胞吞噬能力的有效方法之一,能够有效治疗SAP引起的SIRS。