补气药预防慢性应激致海马神经元损伤研究

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应激导致的海马神经元损伤疾病,呈逐年上升趋势,严重危害人类健康。基于该类疾病发病机制及发病特点,认为该类疾病预防重于治疗。关于预防药物的应用尚无相关报道,利用中药的自身优势和特点,将其应用于该类疾病的预防是解决此类健康问题的方法之一,中医临床数据显示此类疾病的中医分型,兼有脾虚与气虚症较多,进一步对防治此类疾病的主要中药类别进行文献研究发现健脾补气类中药在实验研究中倍受关注,且得到一系列的基础实验数据,所以本文以补气药为研究对象,就此展开研究探讨。目的:通过在皮质酮皮下注射(20mg/kg)制备慢性应激致神经元损伤的小鼠模型的过程中,给予健脾补气类中药水提物,评估该类中药对慢性应激导致的神经元损伤的预防疗效。确定有确切疗效的中药作为研究对象,观察中药对慢性应激损伤神经元发病各环节的的影响,探讨其作用机制。主要检测指标包括血清皮质激素水平、NF-L(神经轻链蛋白)、SYP(突触囊泡蛋白)、BDNF(神经营养因子)、GDNF(胶质源性神经营养因子)、GFAP(胶质酸性纤维蛋白)、S-100(酸性Ca2+结合蛋白)、EATT(酸性氨基酸转运蛋白)等。确定中药预防慢性应激致神经元损伤的有效性及作用机制。方法:根据临床疗效与文献报道确定补气药如人参等中药为本实验的研究对象,选用C57BL/6N小鼠为实验研究动物;采用皮质酮皮下注射的方法制备慢性应激模型;实验将动物按体重随机分组,造模过程中同时给予中药水提物(使用临床应用剂量),实验结束后分别进行体重、免疫器官重量、行为学表现检测,应用放免法测定血中皮质激素水平,应用蛋白免疫印记技术检测中枢神经系统相关蛋白的表达情况。实验一完成中药筛选,实验二再次确定筛选药物的有效性及其作用机制,实验三根据实验进程设计实验进一步探讨实验二结论。结果:实验结果显示所选用的各健脾补气类中药水提物均表现出对神经元保护作用的趋势,尤其是人参水提物效果最佳,各项指标与模型组比较均显示出显著性差异(P<0.01),借此筛选结果进行更进一步的实验设计探讨人参改善神经元损伤的机理。结果显示与模型组相比较:人参水提物能够改善模型鼠行为学变化(P<0.01)及神经元结构蛋白的下调(P<0.01),同时能够显著上调神经系统的营养因子(P<0.01),且不能改善慢性应激导致的血清皮质激素水平上升及由其导致的中枢神经系统损伤标志性蛋白的表达,提示应用人参水提物后并没有阻止损伤的发生,综合上述结果提示人参通过增强神经元修复功能发挥作用。实验三结果显示:在正常情况下人参水提物亦能够上调相关神经营养因子表达。结论与意义:人参能够通过上调神经营养因子,发挥保护海马神经元作用,对抗由应激导致的神经元损伤,逆转由神经元损伤导致的情感、行为异常。其意义在于对临床应用人参预防此类疾病提供实验基础,研究人参对中枢神经元相关病变提供实验数据,为进一步研究人参如何影响中枢神经系统,发挥作用提供新方向。
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