论文部分内容阅读
目的：检测癌-睾丸抗原SSX1-5基因在原发性肝癌中的表达,探索其在肝癌中表达的潜在意义。方法：(1)应用RT-PCR和Western blot方法检测肝癌细胞株Bel-7704、Hep-G2、SMMC-7721中SSXl-5基因在mRNA水平和蛋白水平的表达情况。(2)应用RT-PCR、Western blot和免疫组化方法检测肝癌组织中SSX1-5基因在mRNA水平和蛋白水平的表达情况。(3)应用统计学软件SPSS13.0对实验结果进行统计学分析。结果：(1)SSX1-5基因在mRNA水平的表达情况：①在肝癌细胞株中,检测到SSX1-5基因中,SSX1、SSX2和SSX3基因有表达；②在26例肝癌组织标本中,检测到SSX1-5基因均有表达,且SSX1和SSX3基因表达率均在50%左右,SSX2和SSX4基因的表达率次之,SSX5基因表达率最低为26.9%；5种基因的表达率的差异无统计学意义；③SSX1-5基因在mRNA水平共表达的情况：肝癌细胞株Bel-7404中SSX1和SSX3基因共表达,Hep-G2中SSX1、SSX2和SSX3基因共表达；26例肝癌组织中,至少表达一种SSX基因的比率超过了50%。(2)SSX1基因在蛋白水平的表达情况：①应用Western blot方法,检测到三种肝癌细胞株中SSX1蛋白无表达,肝癌组织中SSX1蛋白的表达率为50%(13/26),配对的癌旁组织和肝硬化组织中无表达；②应用免疫组化方法,检测到肝癌组织切片中SSX1蛋白的表达率为46.9%(23/49),配对的癌旁组织切片中表达率为18.4%(9/49)。(3)将SSX1-5基因的表达结果与肝癌临床指标之间的相互关系作统计学分析发现：SSXl基因在年龄≥50岁组的表达率高于年龄<50岁组,SSX1蛋白在肿瘤直径≥5cm组的表达率高于肿瘤直径<5cm组,其差异均具有统计学意义；此外,在部分(3/7)AFP阴性(<20μg/l)的患者中检测到SSX1蛋白有表达。结论：(1)在肝癌中SSX1基因在mRNA水平和蛋白水平均呈现高频率表达,为SSXl基因成为肝癌特异性免疫治疗的靶位提供了证据。(2)5种SSX基因的表达率差异无统计学意义以及至少一种基因的表达率超过了50%,以上两种结果提示SSX1-5基因的核酸序列可能具有同源性,为由SSX基因家族所衍生的共价表位疫苗提供应用的可能。(3)SSX1基因的表达与患者年龄和肿瘤直径有关,部分的AFP阴性(<20μg/l)的肝癌患者中检测到SSX1蛋白有表达,以上提示SSX1基因的检测对肝癌的辅助诊断和评断预后可能具有潜在价值。