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目的:通过扩大样本量明确PRKCI基因在急性心肌梗死患者外周血白细胞中低表达,利用RNA干扰技术检测PRKCI低表达大鼠心肌细胞低密度脂蛋白的分泌情况,并对其变化进行分析。方法:(1)随机选取吉林大学中日联谊医院心血管内科2014年11月-2015年1月明确诊断为急性心肌梗死的患者20例为实验组,20例正常者为对照组,所有受试者抽取晨起空腹静脉血6ml。以6ml静脉血为样本进行RNA及蛋白提取,分别从RNA水平及蛋白水平对其进行PRKCI蛋白表达量的检测,并对PRKCI基因进行功能分析。(2)利用RNA干扰技术特异性减低大鼠离体心肌细胞内源性PRKCI基因的表达。用PRKCI干扰载体及空白对照载体分别转染离体大鼠心肌细胞,转染24小时后于倒置的荧光显微镜下初步检测转染效率,转染48小时后分别提取被转染心肌细胞的总RNA及总蛋白,利用RT-PCR及Western Blot方法对其进行PRKCI基因表达量的检测,并分别以GAPDH基因及β-actin基因为内参基因。同时,在转染前、转染后12小时、转染后24小时、转染后36小时、转染后48小时分别留取各转染细胞的培养基,利用Elisa法检测培养基中低密度脂蛋白浓度。结果:(1)两组研究对象在低密度脂蛋白胆固醇及高密度脂蛋白胆固醇水平上存在明显差异,急性心肌梗死组的低密度脂蛋白胆固醇浓度较高,高密度脂蛋白胆固醇浓度较低。在RNA水平上,急性心肌梗死组PRKCI基因的相对表达量为0.62±0.11(P=0.032);在蛋白水平,急性心肌梗死组PRKCI蛋白的表达量也明显减低。通路分析发现PRKCI基因参与胰岛素通路、血小板激活通路、wnt信号通路等多条信号通路。(2)倒置的荧光显微镜下可见干扰载体及空白对照载体均成功转染至大鼠心肌细胞,且转染效率无明显差异。在RNA水平上,PRKCI干扰组较对照组PRKCI基因的相对表达量为0.3185±0.058(P=0.032);在蛋白水平,PRKCI干扰组较对照组PRKCI基因蛋白的表达量也明显减低。在低密度脂蛋白水平上,PRKCI干扰组的浓度分别为4.043±0.372ug/m L、4.833±0.0898ug/m L、5.324±0.211ug/m L、6.023±0.131ug/m L、5.585±0.569ug/m L,对照组为4.123±0.140ug/m L、4.103±0.311ug/m L、3.987±0.133ug/m L、4.191±0.0716ug/m L、3.891±0.160ug/m L。由此可见,随着时间的推移,PRKCI干扰组LDL水平随时间延长浓度逐步升高,并于30-40小时达到峰值,而对照组LDL未见明显改变。结论:急性心肌梗死患者外周血白细胞中,PRKCI基因低表达。在H9C2细胞中PRKCI基因低表达促进LDL合成。PRKCI基因低表达导致LDL合成增加,可能是诱发急性心肌梗死的原因之一。