金黄色葡萄球菌是一种人畜共患的条件致病菌,可在不引起疾病的情况下定植在健康人群或动物的鼻腔、咽喉等部位,在宿主免疫力低下时引发多种感染性疾病。带有颜色的金黄色葡萄球菌能产生葡萄球菌金黄色素（Staphyloxanthin,SXT）,是一种重要的毒力因子。SXT不但具有抗氧化作用,还具有改变细菌的化学成分和功能活性、降低细胞膜的流动性、以及稳定细菌结构等功能。调控蛋白Spo VG是金黄色葡萄球菌中控制其毒性的重要调控蛋白之一,与金黄色葡萄球菌的耐药性和生物被膜的形成相关,但对Spo VG如何影响金黄色葡萄球菌细胞色素合成的相关研究较少,本研究将以此为切入点进行相关实验和研究,探究Spo VG调控金黄色葡萄球菌细胞色素合成的分子机制。1.通过PCR验证SH1000Δspo VG、MW2Δspo VG和N315Δspo VG敲除株构建成功,随后设计生长曲线实验,结果表明,spo VG的敲除不影响SH1000、MW2、N315菌株的生长。2.对金黄色葡萄球菌SH1000和SH1000Δspo VG进行转录组测序及蛋白组学分析,转录组学结果显示共有132个基因转录本被定义为DEGs,其中spo VG的敲除导致41个DEGs被上调,91个DEGs被下调。蛋白组学结果显示存在635个差异显著蛋白,其中上调了379个差异显著蛋白,下调了256个差异显著蛋白,且存在三个差异蛋白与细胞色素合成有关。3.研究敲除spoVG对金黄色葡萄球菌细胞色素的影响,结果表明,spo VG敲除后金黄色葡萄球菌中细胞色素的合成能力增强,即Spo VG对细胞色素的合成起负调控作用。4.通过H2O2压力实验和细菌存活率实验检测敲除spo VG对金黄色葡萄球菌氧化压力效应的影响,结果表明当H2O2存在时,SH1000Δspo VG和MW2Δspo VG的存活率分别提高了2.2倍和2.8倍,表明spo VG的敲除增强其氧化压力应激能力。5.通过构建SH1000/pOS-crt、SH1000Δspo VG/p OS-crt报告质粒检测β-半乳糖苷酶的活性,结果显示:SH1000Δspo VG/p OS-crt表达β-半乳糖苷酶的酶活高于SH1000/p OS-crt,说明敲除spo VG可以上调crt启动子活性。通过反转录实时荧光定量PCR实验进一步检测SH1000与SH1000Δspo VG细胞色素合成相关基因crt M和ald H的转录水平。结果表明,敲除spo VG二者转录水平上调,进而表明调控蛋白Spo VG对金黄色葡萄球菌细胞色素合成起负调控作用。