【摘 要】
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该实验是在吴忠义、赵志新的工作基础上,改进ABA-BP的提取方法,以获得足够的蛋白,通过不同盐浓度、不同洗脱时间,对层析的各步骤洗脱蛋白SDS-PAGE检测分析对比,发现此ABA-BP
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该实验是在吴忠义、赵志新的工作基础上,改进ABA-BP的提取方法,以获得足够的蛋白,通过不同盐浓度、不同洗脱时间,对层析的各步骤洗脱蛋白SDS-PAGE检测分析对比,发现此ABA-BP同亲和柱的结合活力同环境溶液的盐离子浓度有密切关系,盐浓度增加,ABA-BP同柱子的结合力下降,极易从柱子中洗脱出来.进一步实现发现,用50mM盐溶液,1毫升/分钟的流速,洗脱200-300毫升去除杂蛋白较为合适.盐浓度过高或洗脱体积太大,都会有ABA-BP洗下来.盐浓度低或洗脱时间短,会除不净杂蛋白.该方法从30克蚕豆下表皮可提取500微克左右的ABA-BP.经过SDS-PAGE、IEF、IEF/SDS-PAGE电泳检测,此蛋白同吴、赵所得的蛋白为同一蛋白.其分子量为42KD,等电点为4.86.
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