基质金属蛋白酶-2及PECK在骨肉瘤侵袭转移中的作用

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目的:骨肉瘤是最常见的骨原发恶性肿瘤, 75%的病人年龄在10-30岁,是青少年时期严重的恶性肿瘤,它恶性程度高,侵袭性强,易早期发生血行转移。虽然辅助化疗和新辅助化疗的应用大大提高了患者的生存率,但仍有近一半患者死于转移。肿瘤的侵袭与转移是恶性肿瘤的主要生物学特征,也是恶性肿瘤患者的主要死因。所以如何有效预防和治疗转移,对改善骨肉瘤患者的预后至关重要。近年来,人们在肿瘤侵袭转移机制及抗侵袭转移治疗领域进行了广泛研究,发现细胞外基质(ECM)在肿瘤的侵袭与转移过程中起了关键性的作用。大量实验证明,肿瘤细胞侵袭转移能力的强弱与其诱导产生的蛋白酶降解ECM及基膜的能力密切相关,而基质金属蛋白酶(MMPs)则是其中最重要的一组蛋白酶,在肿瘤的侵袭和转移中起着重要的作用,近年来,关于MMPs及其抑制剂的研究非常热门。其中RECK基因是由日本学者发现的一个新的基因,具有独特的抑制MMPs分泌与活性的功能,RECK基因的表达与肿瘤的侵袭、转移及血管生成密切相关,可在转录后水平抑制多种MMP的表达,从而抑制肿瘤的侵袭及转移。目前,关于MMPs与RECK的研究多集中在上皮源性恶性肿瘤上,而在骨肉瘤中的表达及相关性的研究,国内外少有报道。本研究利用免疫组织化学染色法,探讨基质金属蛋白酶-2 (MMP-2)及RECK表达与骨肉瘤发生、发展及浸润、转移的关系,并对其临床意义做初步探讨。方法:本实验选择存档中石蜡包埋骨肉瘤标本46例,骨软骨瘤标本20例。骨肉瘤依据病理分类分为3组;依据有无侵袭转移分为2组。RECK、MMP-2的检测采用免疫组织化学SP法,结果采用SPSS11.5统计软件包进行统计分析。应用秩和检验(Kruskal-Wallis Test、Mann-Whitney U)比较MMP-2、RECK在骨肉瘤部位、临床分期、各亚型及侵袭转移的分组变量中的差异,卡方检验(Chi-Square Test)比较MMP-2、RECK在骨肉瘤中的相关性,以及MMP-2、RECK在骨肉瘤中单一表达与侵袭转移的相关性,配对卡方检验(McNemar Test)法测列联系数。P<0.05认为具有统计学意义。结果:MMP-2在骨肉瘤组织中的阳性率为65.22%,在骨软骨瘤对照组织中阳性率为25.00%,两者表达之间的差异有显著性意义,即MMP-2在骨肉瘤组织中的表达显著高于骨软骨瘤对照组织。随着骨肉瘤Enneking分期的不断增加,MMP-2的阳性及强阳性表达率依次增高,三者间的表达有显著差异,在不同性别组、不同部位组、不同病理分型组中, MMP-2的表达无显著性差异。在有无侵袭转移组中,MMP-2的表达有显著性意义,即MMP-2在有侵袭转移组的表达显著高于无侵袭转移组。RECK在骨肉瘤组织中的阳性率为41.30%,在骨软骨瘤对照组织中阳性率为70 %,两者表达之间的差异有显著性意义,即RECK在骨肉瘤组织中的表达显著低于骨软骨瘤对照组织。随着骨肉瘤Enneking分期的不断增加,RECK的阳性及强阳性表达率依次降低,三者间的表达有显著差异,在不同年龄组、不同部位组、不同病理分型组中, RECK的表达无显著性差异,即RECK的表达强度与患者的性别、肿瘤分型均无关。在有无侵袭转移组中,RECK的表达有显著性意义,即RECK在有侵袭转移组的表达显著低于无侵袭转移组。在同一骨肉瘤样本中,MMP-2和RECK表达情况的各组间比较有显著差异,即MMP-2阳性者中有较高RECK阴性倾向。MMP-2和RECK的单一表达与骨肉瘤有无侵袭转移的各组间比较,有显著差异,即MMP-2阳性RECK阴性者有较高侵袭转移倾向。结论:1.在骨肉瘤组织中MMP-2普遍高表达,RECK普遍低表达;在骨软骨瘤中RECK普遍高表达,MMP-2普遍低表达。2.MMP-2和RECK的表达与骨肉瘤的病理组织类型及性别构成、发病部位无明显关系,而与软组织侵袭和远处转移、临床Enneking分期有关。3.MMP-2和RECK在骨肉瘤中的表达有一定的相关性。4.MMP-2和RECK表达之间的平衡在骨肉瘤侵袭转移过程中有重要作用,MMP-2阳性且RECK阴性时具有明显的软组织侵袭和远处转移倾向。RECK及MMP-2的联合检测可望成为骨肉瘤早期诊断和判断预后的分子指标之一。
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