河南省小麦全蚀病菌变种类型鉴定及分子检测

来源 :河南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pxz521520
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
小麦全蚀病是小麦生产上的毁灭性土传病害,自1992年在河南省的浚县、扶沟、原阳等县发现小麦全蚀病以来,该病在河南省的发生与危害呈现逐年加重趋势,近几年来更是在全省呈现大爆发的趋势,严重影响了河南省小麦的安全生产。尽管国内在小麦全蚀病菌的致病性分化,变种类型鉴定及诊断方法等方面已经取得了一定的成果,但是河南省小麦全蚀病菌的变种类型鉴定,分子诊断,致病性分化及寄主范围等仍需要进一步的研究。因此,本文在这些方面对河南省小麦全蚀病菌进行了的研究,主要取得了以下结果。1、弄清了河南省小麦全蚀病病原菌的主要种类。2012年从河南省的开封、新乡、濮阳、古荥、商丘、周口、驻马店、焦作和济源等地区分别采集具有症状的小麦全蚀病病株样本,经过室内组织分离,单菌丝尖端切取纯化,共得到小麦全蚀病菌89株。在PDA培养基上,菌落为圆形,生长初期呈灰白色,后期颜色逐渐加深,最后变为黑色,菌落的边缘向中心反卷。用PD三角瓶法诱导产生子囊壳,通过测量发现子囊壳、子囊孢子、附着枝和分生孢子均与禾顶囊壳小麦变种(Gaeumanomyces graminis var.tritici)的特征相似,初步证实河南省小麦全蚀病病原菌为禾顶囊壳小麦变种。利用Rachadwong和王美南设计的针对禾顶囊壳变种的特异性引物对供试菌株进行PCR检测,结果显示,所有菌株均得到了大小为870bp的DNA片段,并无其他变种的特异性条带出现。利用真菌通用引物ITS4和ITS5针对供试菌株基因组的ITS1-5.8s-ITS2进行PCR扩增,使用MEGA5.2软件对PCR产物的测序结果进行ITS聚类分析,建立系统发育树后,结果显示:本实验的所有供试菌株全部和6株GenBank登录的禾顶囊壳小麦变种代表性菌株聚在了一起,具有很高的同源性,与其他变种的遗传距离相对较远,可以明显的与其他变种区分开来。以上两种分子技术的研究结果与形态学鉴定的结果相符,进一步证明了所有供试菌株为禾顶囊壳小麦变种。2、明确了病菌对我省主要农作物及田间杂草的致病性。用麦粒法测试了禾顶囊壳小麦变种对小麦、燕麦、玉米、黑麦、花生、棉花、大豆的致病性,结果表明,大部分供试菌株可造成供试禾本科作物根部组织坏死或腐烂,类似于小麦全蚀病的症状,个别供试菌株可造成燕麦根部及茎基部轻微变褐。花生、大豆、棉花只是局部次生根变褐,病变的根茎组织经分离纯化得到小麦全蚀病菌,证明该症状是由其引起。用盆栽麦粒沙接种法测定了禾顶囊壳小麦变种对主要田间杂草的寄生范围,供试植物包括禾本科的稗草、无芒稗、虎尾草、马塘、狗尾草、画眉草、狼尾草、看麦娘、牛筋草;莎草科的香附子;菊科的黄顶菊、苦苣菜;阔叶类的播娘蒿、牛繁缕、苘麻、鲤肠、反枝苋、葎草、紫穗苋、萹蓄、苍耳、旋复花、小黎、铁苋菜等。结果表明,除了稗草和芒稗未表现症状之外,其他杂草的茎基部和根部均有不同程度的变褐发黑症状,尤其是禾本科杂草表现症状与小麦全蚀病症状类似,经分离纯化均得到小麦全蚀病菌。3、河南省小麦全蚀病菌菌株之间致病力存在显著性差异。温室测定89株供试菌株对小麦的致病力,结果显示,河南省小麦全蚀病菌菌株之间致病力存在显著性差异,不同地区菌株之间的致病力存在显著性差异,同一地区不同菌株之间的致病力也存在极显著性差异。测试供试菌株对玉米的致病力,结果表明,禾顶囊壳小麦变种在玉米上的致病性呈现连续性变化,由不致病到强致病,并且不同地区菌株之间的致病力存在显著性差异,同一地区不同菌株之间的致病力也存在极显著性差异,表明禾顶囊壳小麦变种在玉米上的致病性有分化。4、优化了快速检测小麦全蚀病菌的方法。通过对王美南,张秋娥等人公布的引物Ggt:AV3的验证,并对其PCR反应体系进一步的优化,建立了一套快速检测小麦全蚀病菌的体系,该方法可以直接从患病小麦根部进行Ggt检测,且该引物能用于不同发病级别小麦根部Ggt的检测,随着发病程度的增加,条带的宽度和亮度均随之增加,表明该引物可用于小麦全蚀病的早期诊断及病害的预测预报。
其他文献
杰克贝尔氏粉蚧PseudococcusjackbeardsleyiGimpel&Miller为我国大陆未发生分布的检疫性粉蚧,极易随进境水果、蔬菜、种苗等进行传播和扩散。为研究确定阻止其繁殖的不育剂量,
小麦是中国的主要粮食作物之一,种植面积仅次于水稻。荠菜是影响小麦产量的重要阔叶杂草之一,而苯磺隆是用于防除麦田阔叶杂草的常用磺酰脲类除草剂。当苯磺隆在小麦主产区连续
植物精油是一类植物源次生代谢产物,含有特殊的活性成分,具有抗菌防腐功能,为了开发其在果蔬病害防治中应用的新途径,本文采用菌丝生长速率法、孢子萌发法、活体组织法和盆栽试验法系统测试了肉桂精油对番茄灰霉病菌、苹果青霉病菌、番茄茎枯病菌和黄瓜镰刀病菌4种重要果蔬病原真菌的抑菌作用,以及肉桂精油、茴香精油和两种混合精油肉桂+茴香(1:1)、肉桂+丁香(1:1)对番茄灰霉病菌的抑菌活性。测定了冷藏条件下肉桂
马铃薯(Solanum tuberosum)(Solanales:Solanaceae)是世界上重要的粮食作物。长期以来因蚜虫危害而造成巨大经济损失。桃蚜(Myzus persicae)和马铃薯长管蚜(Macrosiphum euph
本文重点研究大气颗粒物的粒径分布特征和有机氯农药(Organochloride Pesticides,OCPs)的粒径分布特征,在黑龙江大学工作站于2016年12月-2017年5月共采集大气总悬浮颗粒物(Total Suspended Particulate,TSP)和分粒径级样品325个,基于黑龙江大学站采集的样品研究哈尔滨地区大气颗粒物OCPs随时间、天气等状况的变化在颗粒物粒径中的分布情况,
球毛壳(Chaetomium globosum) ND35是一株优势内生真菌。本论文以杨树组培苗和黄瓜幼根为试材,研究了球毛壳ND35子囊孢子萌发后在宿主植物上的侵染定殖方式和途径。研制了以
水稻白叶枯病和水稻细菌性条斑病(简称水稻条斑病)是水稻上最重要的两个细菌性病害,在我国乃至东南亚的某些地区甚至成为主要病害,危害巨大。其病原菌分别是Xanthomonas oryzae p
姜黄素类化合物是药用植物姜黄的主要成分,因具有消炎、抗氧化、抗肿瘤等多重药理活性而受到广泛关注。近年来,随着研究的拓展,姜黄素类化合物的农用活性日渐引起人们的重视。该类化合物对朱砂叶螨表现出良好的生物活性,同时还具有多样化的作用方式,为新型杀螨剂的开发提供了新的材料。在姜黄素类化合物的3种单体中,又尤以双去甲氧基姜黄素的杀螨活性最为理想。本研究以双去甲氧基姜黄素为主要研究对象,进行了稳定性研究及增
漂浮育苗是目前我国烤烟育苗主要方式,其施肥技术一直采用漂浮液施肥方法,此方式存在施肥次数多、养分供应不规律、肥料利用率低、污染环境等缺陷。本试验通过烟草漂浮育苗中控释肥种类筛选、施肥量和施肥高度设定等处理,探讨各处理对烟草出苗率、烟苗农艺性状、成苗期烟苗CAT(过氧化氢酶)、SOD(超氧化物歧化酶)活性的影响,为烟草漂浮育苗控释肥技术开发和应用提供理论和实践。各试验结果如下:(1)控释时间6个月,