富硒长双歧杆菌优势菌株筛选及发酵工艺研究

来源 :上海师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gongwen_2003
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双歧杆菌(Bifidobacterium)是1899年由法国学者Tissier从母乳喂养的婴儿粪便中分离出的一种厌氧的革兰氏阳性杆菌。它是人体内具有益生功效的优势菌群,在维持和提高免疫力、促进人体发育、延缓机体衰老、以及抗肿瘤等方面有非常重要的作用,双歧杆菌已成为人体健康的重要指标之一。硒是人体必需的微量元素,具有干预各种癌症的作用。无机硒、有机硒及元素硒是硒的几种主要存在形式,有机硒,元素硒及无机硒三者的生物利用度依次下降,而毒性依次提高。微生物转化硒产品除低毒性和生物利用度高的特点之外,还具有一系列对于人类有益的功效,因此开发富硒长双歧杆菌具有巨大的前景。本文通过富硒长双歧杆菌高通量筛选培养,利用长双歧杆菌生理代谢特点将培养液中无机硒转化为有机硒,从而获得更高生物利用度的富硒长双歧杆菌,通过对7L罐发酵条件以及冻干条件的进一步优化,得到硒蛋白含量高的富硒长双歧杆菌。首先,通过采用96孔深孔板微型化培养和酶标仪检测,建立一种快速、高效的富硒长双歧杆菌高通量筛选技术,采用初筛与复筛、富硒驯化初筛与复筛及摇瓶验证相结合的方式,筛选到一株富硒长双歧杆菌菌株XBL-20。与原始菌株相比,其摇瓶发酵活菌数提高了3倍,罐发酵活菌数约提高了4.4倍,且多次传代均能维持在较高活菌水平。其次,通过对发酵种子、发酵培养基成分、7L罐培养条件、冻干条件以及亚硒酸钠添加条件的优化,最终得到硒蛋白含量高的富硒长双歧杆菌。经过条件摸索后已经连续发酵3个批次,获得硒蛋白含量高达85%以上富硒长双歧杆菌。
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