犬源乳酸菌的筛选及其对番泻叶介导的犬腹泻的防治试验

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犬腹泻是由多病原、多因素引起的以犬排便次数增加,粪便中水分增多为特征的一种临床症状,严重危害犬的健康。自青霉素问世以来,抗生素在犬腹泻的防治中发挥了重要的作用。但抗生素的长期或大量使用,一方面导致药物残留问题越来越突出;另一方面导致细菌耐药性的产生并加剧肠道菌群的紊乱。肠道菌群作为动物消化道内第一大微生物群落,众多研究已经证实,其紊乱是导致动物腹泻的重要因素。因此,从调节肠道菌群角度出发,寻找一种安全有效的微生态制剂已成为当前国内外研究的热点。乳酸菌是动物胃肠道中的优势菌群,在促进动物生长、增强机体免疫力、抗感染、调节肠道微生态平衡等多方面发挥重要作用,也是目前在动物保健及疾病防治中最广泛应用的一类益生菌。然而,犬用微生态制剂却还在起步阶段,微生态制剂菌株也较少。因此,本研究以筛选出犬源抗腹泻乳酸菌为目标并探究其对肠道菌群的调节作用,展开如下研究:首先,本试验以健康犬为乳酸菌的分离对象,以遵循适合于微生态制剂所选菌株应遵循的种属特异性的原则,从健康犬体内共分离到16株乳酸菌,分别命名为L1、L2、L3、L4、L5、L6、L7、L8、L9、L10、L11、L12、L13、L14、L15和L16。其次,通过细菌培养、形态学特征、生理生化试验及l6S r RNA同源性分析,鉴定L1-L12为动物乳杆菌(Lactobacillus animalis),L13和L14为鼠乳杆菌(Lactobacillus murinus),L15为约氏乳杆菌(Lactobacillus Johnsonii),L16为嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)。最后,通过检测L1-16菌株对酸的耐受力、对胆盐的抵抗力以及对致病性大肠杆菌和沙门氏菌的抑制作用,筛选出了动物乳杆菌L5。L5在p H为1.8和胆盐浓度为0.3%的条件下能够存活,存活率分别为84.6%和3.2%,并且能够抑制肠道内致病性大肠杆菌和沙门氏菌的生长。此外,本研究还以番泻叶介导的犬腹泻模型为研究对象,通过饲喂L5菌株来研究其对犬腹泻的临床防治效果并探究其对肠道菌群的影响。结果表明,试验组犬的腹泻程度明显轻于模型组的;与腹泻犬相比,饲喂L5菌株可以明显增加犬肠道内乳酸菌含量,降低大肠杆菌、沙门氏菌、梭菌及肠球菌的含量。这些结果暗示,L5也许通过调节肠道菌群结构,发挥抗犬腹泻的作用。综上所述,本研究成功筛选出具有抗犬腹泻作用的乳酸菌菌株,为犬的相关微生态制剂和保健产品的研发提供备选菌株,也为犬腹泻的防治提供新思路。
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