论文部分内容阅读
近年来酒精中毒患者有增多趋势，大约1／3-2／3的酗酒者有肌肉功能障碍。骨骼肌细胞不含乙醇脱氢酶，乙醇本身的毒性作用是酒精中毒性肌病最重要的致病因素。第一章实验研究不同浓度乙醇处理小鼠骨骼肌成肌细胞C2C12，及乙醇处理C2C12C细胞不同时间后细胞的增殖变化，研究急性乙醇处理对骨骼肌细胞增殖的直接作用，进一步研究了100mM乙醇处理C2C12细胞24小时后细胞周期的变化。大量研究报告证实低强度激光或单色光照射对远离内稳态的生物系统有显著的效果。可见光和红外光都可以启动细胞的信号转导通路。发光二极管（light emitting diode array，LED）以它固有的优势，未来完全有可能在生物医学领域代替目前的激光。第二章实验以发光二极管红光（640±17nm）[red light（640±17nm）from LED，RLED]照射增殖被乙醇抑制的C2C12细胞，研究低强度RLED对骨骼肌细胞增殖的光生物调节作用（photobiomodulation，PBM）。1．乙醇对骨骼肌成肌细胞C2C12的增殖功能的影响乙醇对骨骼肌细胞的损害之一可能是影响了细胞的增殖功能。用不同浓度乙醇分别孵育C2C12细胞4、8、16和24小时。用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐[3-（4，5-Dimethylthiazol-2-yl）-2，5-diphenyltetrazolium bromide，MTT]比色法检测增殖。结果显示，乙醇处理C2C12细胞不同时间，乙醇浓度越高，对C2C12细胞增殖的抑制效果越显著。乙醇处理4h时，150mM、200mM乙醇能显著抑制细胞增殖（P＜0.05）。乙醇处理细胞的时间较长时（8h以上），各种浓度的乙醇（包括50mM）都可以显著抑制细胞的增殖（P＜0.05）。分别用50、100、150和200mM乙醇孵育C2C12细胞不同时间。结果显示乙醇处理细胞8h时对细胞的增殖抑制最显著。说明急性乙醇处理可抑制C2C12细胞的增殖。用碘化丙锭（propidium iodide，PI）对100mM乙醇处理24h的C2C12细胞染色，流式细胞仪检测结果显示处理组G0／G1、S和G2／M期细胞数目与对照组的各期细胞数目皆无显著性差异。2．低强度发光二极管红光对乙醇抑制C2C12细胞增殖的康复作用C2C12细胞未被乙醇处理时，其功能正常，处于内稳态，不同强度RLED对其增殖并无影响。乙醇对C2C12细胞增殖的抑制改变了细胞的内稳态，PBM具有恢复细胞的内稳态的功能。用RLED照射150mM乙醇处理4h或8h的细胞时，1134mJ／cm2（1.26mW／cm2，900s）能显著促进细胞的增殖（P＜0.05）。用RLED照射100mM乙醇处理16h的细胞时，252mJ／cm2（0.28mW／cm2，900s）能显著促进细胞的增殖（P＜0.05）。用RLED照射100mM乙醇处理24h细胞时，495mJ／cm2（0.55mW／cm2，900s）（P＜0.05）和576mJ／cm2（0.64mW／cm2，900s）（P＜0.01）能显著促进细胞的增殖，且0.28mW／cm2-0.64mW／cm2的RLED光强与C2C12细胞增殖的PBM呈线性关系（P＜0.05）。实验结果支持PBM的生物信息模型。结论：急性乙醇处理可显著抑制C2C12细胞的增殖。不同强度的RLED对乙醇抑制C2C12细胞增殖的有康复作用。