香蕉束顶病毒中国漳州分离物DNA 4的结构与功能研究

来源 :中国科学院微生物研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lllwan1
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应用PCR方法克隆了香蕉束顶病毒中国漳州分离物(Banana Bunchy Top Virus Chinese Zhangzhou isolate,BBTV-ZZ)DNA 4,并测定了其全序列.序列分析表明BBTV-ZZ DNA 4由1,039 nt组成,归属于BBTV亚洲组.采用5RACE分析方法,初步确定其转录起始位点是在第269 nt处的A.应用原核表达核体pTYB2,构建了BBTV-ZZ DNA 4编码区的融合表达载体pTYB-B4.以表达的69kD的融合蛋白为抗原制备了兔抗血清.利用植物双元载体pBin438构建了含有BBTV-ZZ DNA 4编码区的植物表达载体pBBTV-4B,经农杆菌介导转化了三生烟(Nicotiana tabacumcv .Xanthinc).在防虫条件下,将运动缺陷型CMV-Fny突变株(CMV-Fny-ΔMP)人工接种到表达BBTV-ZZ DNA 4编码蛋白质的转基因植株下部叶片上.结果表明转基因植株能够支持CMV-Fny-ΔMp从细胞到细胞和长距离运动并形成系统侵染症状.首次在整体植物上证明了BBTV-ZZ DNA 4编码的蛋白质可能具有运动蛋白的功能.结果证明BBTV-ZZ DNA 4的启动子是一个维管组织特异性表达的强启动子.
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