诱导性肝样细胞(induced hepatocyte-like, iHep)是通过模拟肝细胞的发育过程，在体外将非肝细胞诱导分化形成的具有肝细胞形态和功能的一类细胞。诱导性肝样细胞能够表达肝细胞特异性基因，发挥肝细胞特异的功能，如：分泌白蛋白，吸收和排出吲哚青绿(ICG)，合成尿素，储存糖原等。直接分离的原代肝细胞很难在体外增殖培养，因此从其他细胞转化成可替代肝细胞的诱导性肝样细胞的研究对于开展细胞分化调控、再生医学、细胞发育等的基础研究以及肝脏疾病的细胞治疗与药物研究和开发等具有重要意义。本研究以大鼠诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells, iPSCs)为起始细胞，采用了分阶段逐步诱导的方法将其诱导分化成肝样细胞。在诱导过程中，先将细胞由含activin A的培养基培养3天，使细胞向内胚层分化；接着用含FGF4和BMP2的培养基培养4天，使已经开始分化的细胞向肝系细胞特异性分化；再分别由含HGF和KGF培养基培养6天、含OSM和DEX培养基培养8天，使分化的细胞进一步扩大增殖和分化，形成成熟的肝样细胞。对上述各个阶段的细胞检测，结果显示，在activinA诱导3天，FGF4和BMP2诱导4天后，iPSCs形态发生明显的变化，由边界清晰且致密整齐的克隆形态向上皮样细胞转变，从mRNA水平检测到有肝特异基因Alb、Afp、Ck18、G6p和Hnf4α的表达。其中，Afp和Ck18的表达水平较高，Alb、G6p和Hnf4α的表达水平较低。免疫荧光染色检测结果显示，上述诱导的细胞表达大鼠肝细胞的标志蛋白AFP、ALB和CK18。由HGF和KGF培养6天、OSM和DEX培养8天，细胞变成典型的上皮样细胞，继续培养21天后，形成肝样细胞后，从mRNA水平检测到Alb、Afp、Ck18、G6p和Hnf4α的表达。对这些诱导的肝样细胞进行肝细胞功能检测，发现他们能特异性地吸收和释放ICG，储存糖原，以及合成尿素。综上结果表明，本实验成功的将iPSCs诱导成肝样细胞。