载BMP短纤维涂覆多孔HA支架制备及其性能表征

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钙磷酸盐生物陶瓷如羟基磷灰石(HA)等,它与自然骨中发现的钙磷酸盐的成分相似,具有卓越的生物相容性,被广泛应用于骨组织工程。但HA很难在不破坏其生物功能化表面的情况下载入生长因子,因此,单一的HA支架在体内植入后,在组织生长过程中易出现内部营养供应不足的问题。而根据细胞外基质(extracellular matrix, ECM)中的重要成分——胶原蛋白,主要以纳米纤维的形式存在并构成纤维网架,构建具有类ECM结构的仿生支架可能为细胞在体外的生长提供理想的微环境。本课题中,在构建类ECM结构仿生支架的同时,为了使多孔HA支架在骨缺失修复过程中促进骨组织加速生长,采用载有骨形态发生蛋白-2(BMP-2)的聚乳酸短纤维对HA支架表面进行修饰,形成药物缓释体系。利用乳液静电纺丝工艺制备装载BMP-2的聚乳酸纤维,将纤维短切后分散在海藻酸钠(SA)溶液中,并涂覆在HA多孔支架表面获得短纤维复合支架。对复合支架微观形貌、孔隙率、力学性能等进行表征,并对复合支架进行进一步的细胞实验和异位成骨实验,本实验获得以下结论:(1)使用粒子滤除法制备出贯通性良好的HA多孔支架,纯HA支架最大抗压强度0.52±0.07 MPa,当将PLLA短纤维结合到支架表面后,支架抗压强度增加到1.16+0.25Mpa,同时对支架的贯通性及孔隙率几乎没有影响;(2)利用铜板切片法制备PLLA短纤维操作简单,单根短切纤维长度在500μm左右。并且SA对短纤维的分散效果最佳,使纤维可以均匀的涂覆在支架表面。(3)在体外释放实验中,复合支架降低了蛋白早期的突释量,1d内蛋白的突释量仅为21.5%,且持续释放时间约为4周。(4)从细胞实验结果可得出,支架表面涂覆短纤维,模拟了细胞外基质结构,有利于细胞的黏附和增殖。(5)体内异位植入实验得出,支架内部有较多组织长入,说明支架生物相容性良好,纤维复合支架生骨及血管量较HA支架多,说明支架表面的类细胞外基质结构对支架整体的异位成骨诱导性能具有显著的影响;BMP-2复合支架的新生骨及新生血管量最多,说明复合支架载药体系可以很好地促进骨修复。
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