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目的:以《中华人民共和国药典》(2015版)收载的5种蔷薇科果实类药材(木瓜、山楂、覆盆子、金樱子和乌梅)为实验对象,采用不同溶剂提取和不同溶剂萃取,探索5种药材抗氧化活性大小及各药材的抗氧化活性成分群的极性分布。建立薄层色谱-生物自显影方法,快速表征五种药材萃取物中主要抗氧化活性成分;建立HPLC相关方法测定各药材多酚类物质,分析五种药材主要多酚成分。通过本实验以期为蔷薇科果实类药材抗氧化活性物质研究提供理论和实验依据。方法:1建立抗氧化活性评价体系,筛选提取溶剂,考察五种药材中抗氧化活性成分存在的萃取部位本研究采用清除自由基法及氧化还原法两类方法,从甲醇、乙醇和丙酮中筛选提取溶剂,并选择石油醚、乙酸乙酯和正丁醇作为萃取溶剂,综合评价五种药材不同萃取部位的抗氧化活性。通过DPPH法,ABTS法,Fenton法和FRAP法确定合适提取溶剂,考察宣木瓜不同萃取部位对自由基及Fe3+的清除效果,根据评价方法结果为其他四种药材确定抗氧化活性评价方法,筛选提取溶剂,综合评价抗氧化活性,对比讨论不同药材提取物的抗氧化活性及各药材不同萃取部位的抗氧化活性大小。2采用Folin-Ciocalteu法测定多酚含量并分析其与抗氧化活性相关性采用Folin-Ciocalteu法测定不同药材醇提物及各药材不同萃取部位的总多酚含量,运用SPSS软件分析不同药材提取物及各药材不同萃取部位的抗氧化活性大小与多酚含量的相关性。3建立薄层色谱-生物自显影法检识五种药材不同萃取部位的抗氧化活性成分选择聚酰胺板为薄层板,DPPH为显色剂,对各药材不同萃取部位中具有抗氧化活性的多酚成分采用薄层色谱-生物自显影法检识,进行定性测定,确定各药材不同萃取部位中主要多酚成分。4建立HPLC法,对五种药材具有较强抗氧化活性部位中所含多酚成分进行辨识并测定各成分含量。采用HPLC法,选择C18色谱柱,甲醇与磷酸水溶液(p H2.2)为流动相,采用波长切换法,对五种蔷薇科果实类药材的具有较强抗氧化活性部位进行液相色谱分析,进一步确定各药材活性部位多酚类物质成分,比较五种药材的共性和特性。结果:1不同提取溶剂的结果表明,宣木瓜的甲醇提取物在DPPH法,ABTS法,Fenton法和FRAP法中均表现出显著的抗氧化活性,且随着各个样品浓度的增加抗氧化能力逐渐增加;宣木瓜醇提物的乙酸乙酯部位较石油醚和正丁醇部位,表现出较强的抗氧化活性;选择DPPH法和FRAP法来评价其他4种药材的不同溶剂提取物及不同萃取部位抗氧化活性,结果表明,宣木瓜等四种药材的甲醇提取物均表现出良好的抗氧化活性,其乙酸乙酯和正丁醇部位的抗氧化活性优于石油醚部位;但山楂甲醇提取物的乙酸乙酯和石油醚部位的抗氧化活性优于正丁醇部位。2总多酚测定的结果显示,覆盆子甲醇提取物的多酚含量最高,乌梅最低;五种药材不同萃取部位的多酚含量有所不同,覆盆子与金樱子正丁醇部位多酚含量最高,宣木瓜、山楂和乌梅乙酸乙酯部位多酚含量最高。在总多酚与抗氧化活性的相关性分析中,五种药材的甲醇提取物多酚含量与DPPH法测得的抗氧化活性相关系数为-0.871,与FRAP法测得的抗氧化活性相关系数为0.966,两者相关性分别为高度相关与显著性相关;不同萃取部位多酚含量与DPPH法测得的抗氧化活性相关系数为-0.454,与FRAP法测得的抗氧化活性相关系数为0.477,两者分别为存在一定相关与显著性相关,表明多酚含量与抗氧化活性的相关性良好。3薄层色谱-生物自显影结果表明,五种蔷薇科果实类药材的各萃取部位在薄层色谱中均表现含有抗氧化活性成分;通过对照品比较,检识多酚成分。所选取的总多酚对照品除椴树苷外,均具有清除DPPH自由基的能力;可确定的多酚成分是覆盆子中为没食子酸,金樱子中为儿茶素和原儿茶酸,山楂中为原儿茶酸、绿原酸和表儿茶素,乌梅中为绿原酸,宣木瓜中为原儿茶酸和绿原酸。4 HPLC测定结果表明,五种药材的乙酸乙酯部位中均具有较多的多酚成分,各药材所含多酚成分均不完全相同。覆盆子所含多酚成分为没食子酸、鞣花酸、椴树苷;金樱子所含多酚成分为没食子酸、原儿茶酸、儿茶素、鞣花酸、椴树苷;山楂所含多酚成分为原儿茶酸、绿原酸、表儿茶素、金丝桃苷、芦丁、槲皮素;乌梅所含多酚成分为原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、对羟基苯甲酸、槲皮素;宣木瓜所含多酚成分为没食子酸、原儿茶酸、绿原酸、对羟基苯甲酸、芦丁、槲皮素。其中,原儿茶酸是四种药材(金樱子、山楂、乌梅、宣木瓜)共有成分;没食子酸是三种药材(覆盆子、金樱子、宣木瓜)共有成分;绿原酸和槲皮素为三种药材(山楂、乌梅、宣木瓜)共有成分;芦丁为两种药材(山楂和宣木瓜)共有成分;对羟基苯甲酸为两种药材(乌梅和宣木瓜)共有成分;咖啡酸只于乌梅中检测到;儿茶素只于金樱子中检测到;表儿茶素和金丝桃苷只于山楂中检测到;鞣花酸和椴树苷只于覆盆子与金樱子中检测到。结论覆盆子、金樱子、山楂、乌梅和宣木瓜的甲醇提取物均具有良好的抗氧化活性;抗氧化活性成分主要存在于乙酸乙酯、正丁醇萃取部位中;五种药材的抗氧化活性与多酚含量有较好的相关性。高效液相色谱法分析结果表明,五种药材乙酸乙酯部位的多酚成分组成既有有相似性,各自也有其特有成分,咖啡酸只于乌梅中检测到;儿茶素只于金樱子中检测到;表儿茶素和金丝桃苷只于山楂中检测到;鞣花酸和椴树苷只于覆盆子与金樱子中检测到。。