针对当前奶牛养殖过程中奶牛采食黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1.AFB1)污染饲料带来的牛奶和奶制品黄曲霉毒素M1(Aflatoxin Ml, AFM1)的污染问题,本文研究了日粮中AFB1到牛奶的转化率、牛奶中AFM1的清除规律,以及AFBl对奶牛生产性能和健康的影响。同时,评价了吸附剂Solis Mos (SM)的添加效果。具体研究内容与获得的结果如下。1、长三角地区奶牛场日粮中AFB1和原料奶AFM1的季节性变化(试验一)本试验调研了长三角地区18家奶牛场全混合日粮(Total Mixed Ration, TMR)中AFB1和原料奶AFM1在4个季节的发生率和污染程度。每个季节收集15份TMR样本,4个季节共采集60份TMR样本；而每个季节从奶缸中采集18份混合牛奶样,4个季节共采集72份原料奶样。TMR中AFB1测定应用HPLC-FLD方法(检出限为0.3μg/kg),牛奶AFM1测定应用LC-MS/MS方法(检出限为0.01μg/L)。应用SAS9.2(SAS Institute Inc., Cary, NC)单因素方差分析程序检验4个季节的TMR AFB1和牛奶AFM1的浓度差异。AFB1在28份TMR样本(46.7%)中被检出,AFB1浓度范围0.332-4.040ug/kg。冬季TMR中AFB1浓度显著高于春季和秋季(P<0.05),但与夏季没有显著差别。总共72份奶样中有43份牛奶样检测出AFM1(59.7%),其浓度范围为0.01-0.42μg/L。冬季原料奶中AFM1浓度(0.123μg/L)显著高于其他季节,春季(0.029μg/L)、夏季(0.032μg/L)与秋季(0.032μg/L)牛奶样AFM1浓度差异不显著(P>0.05)。本试验结果显示,TMR中AFB1以及牛奶中AFM1的污染呈现季节性差异,冬季和夏季饲料易致AFB1污染,而冬季牛奶污染AFM1风险最高,因此对牧场饲料和牛奶的AFs管理中需要考虑季节性因素。2.日粮AFB1向牛奶的转化以及日粮中添加SM的效果(试验二)本研究的目的是研究日粮AFB1到乳AFM1的转化率和乳中AFM1的清除规律,并评价SM对摄入不同剂量AFB1的奶牛乳中AFM1、奶牛血液生化指标和瘤胃发酵参数的影响。选择24头泌乳后期经产荷斯坦奶牛(泌乳天数271±29d；奶产量21.6±3.1kg/d),随机分为3组,每组8头。3组奶牛被安排进行3个小试,每个小试含2个处理,每个处理4头牛,采用交叉试验设计。小试1、2、3中奶牛分别采食含AFB1含量为0、20、40μg/kg.DM的日粮,每个小试中,奶牛接受对照组或添加0.25%的SM处理组。每个小试分为两个连续的时期,每期含有4d预试期(d1-4)、7d AFB1饲喂期(d5-11)和5d清除期(d12-16)。完成第一期试验后,将对照组和处理组对换,进入第二期试验。在每期试验第1、2和10-14d,采集TMR和牛奶样本；d1、11和14的晨饲前,通过尾静脉采集10mL血液至肝素管；d1和11晨饲后2h,通过口腔瘤胃导管采集50mL瘤胃液。结果发现,采食基础日粮奶牛乳中AFM1的本底水平是0.003gg/L；采食含20μg/kg AFB1日粮的奶牛乳中AFM1均值为0.105μg/L,日粮AFB1到牛奶的转化率为0.56%；采食含40μg/kg AFB1日粮的奶牛乳中AFM1均值为0.209μg/L,日粮AFB1到牛奶的转化率为0.59%。当奶牛停止采食AFB1污染日粮3d后,乳中AFM1即可清除。添加SM到含20μg/kg AFB1的日粮中能够显著减少奶中AFM1浓度(0.105vs.0.088μg/L, P<0.05),降低AFB1向牛奶中的转化率(0.56vs.0.46%,P<0.05)；但在含40μg/kg AFB1日粮中添加SM并不能降低牛奶中AFM1浓度。在基础日粮中添加SM能够增加总挥发性脂肪酸(VFA)浓度(99.6vs.94.2mM, P<0.05)、微生物蛋白(MCP)含量(3.3vs.2.9mg/mL, P<0.05)以及羧甲基纤维素酶(CMCase)活性(0.34vs.0.26U, P<0.05);在含20μg/kgAFB1日粮中添加SM能增加总VFA浓度(99.8vs.93.4mM, P<0.05), MCP含量(3.2vs.2.7mg/mL, P<0.05)以及CMCase活性(0.28vs.0.22U, P=0.07);但是,在含40μg/kg AFB1日粮中添加SM并未改变瘤胃发酵参数。无论是在基础日粮,还是在AFB1污染日粮中添加0.25%的SM,均不影响奶牛泌乳性能、肝功能和体液免疫,但可降低机体氧化应激。本试验结果表明,日粮中AFB1转化为乳AFM1的比率为0.46%-0.59%,乳中AFM1彻底清除需要3d；添加SM不影响奶牛的产奶量和乳成分；在20μg/kgAFB1日粮中添加SM可降低奶牛AFM1浓度,改善奶牛健康状况。3.长期摄入AFB1对奶牛生产性能和健康的影响以及SM的添加效果(试验三)本研究的目的是评估长期摄入AFB1的奶牛泌乳性能和健康状况,以及添加霉菌毒素吸附剂SM的效果。40头泌乳初期荷斯坦奶牛根据泌乳天数(33±7d)和奶产量(33.9±3.1kg)随机分为4个处理组。采用2因子2水平交叉试验设计,即AFB1(0或20μg/kg DM)和添加SM(0或0.25%)。奶产量和乳成分每周测定,血清生化指标和瘤胃发酵参数在正试期前1天和试验第8周进行测定。乳中AFM1采用HPLC-MS/MS进行分析。应用SAS程序的MIXED模型对试验数据进行统计分析。添加AFB1或SM不影响干物质采食量(23.9±0.34kg/d)、产奶量(35.5±0.76kg/d)、乳蛋白(2.92±0.056%)、乳脂肪(3.64±0.108%)和线性体细胞(5.1±0.39)等泌乳性能。在含AFB1的日粮中添加SM能显著降低乳中AFM1浓度(0.191vs.0.134μg/L, P<0.01)和AFB1转化为乳AFMl的比率(1.38vs.0.89%,)。给奶牛饲喂AFB1污染饲料会降低过氧化物岐化酶、总抗氧化能力、谷胱甘肽过氧化酶活性、IgG和IgA含量(P<0.05),而增加丙二醛浓度(P<0.05)。日粮中添加SM能够增加血浆过氧化物岐化酶活性、总抗氧化能力和IgG的含量,而减少丙二醛含量(P<0.05)。 AFB1和SM均不影响血浆谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶活力和IgM浓度(P>0.05)。AFB1仅降低CMCase活性而不影响其它发酵参数。然而,添加SM可以增加NH3-N、 MCP和VFA含量和CMCase活性、降低pH值,但并不影响VFA组成以及木糖酶和淀粉活性。本试验结果表明,日粮中AFB1分泌到泌乳早、中期奶牛乳中的比率高于后期；AFB1或SM均不影响奶产量和乳成分,但添加SM可降低乳中AFM1浓度,减缓长期摄入AFB1给奶牛健康带来的不利影响。综上所述,牧场乳品安全需要考虑牛奶和饲料AFs污染的季节性差异；泌乳早中期和后期奶牛将日粮AFB1转化乳AFM1的比率分别为0.89%-1.38%和0.46%-0.59%；本试验条件下,SM或AFB1均不影响泌乳奶牛的产奶量和乳成分；添加SM可降低AFB1的转化率,改善奶牛的健康状况。