【摘 要】
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Pc-pis 是来源于大黄鱼的 piscidin 样（piscidin-like）抗菌肽（Antimicrobial peptide,AMP）。前期研究中,我们发现Pc-pis能快速杀伤肿瘤细胞。为了开发其在抗肿瘤方面的应用,我们通过以下几个方面,进行了初步的研究和探索。用化学合成的Pc-pis处理HeLa细胞,扫描电镜观察细胞死亡的形态特征。正常细胞表面上的绒毛数量较多且弯曲,细胞膜光滑完整,P
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Pc-pis 是来源于大黄鱼的 piscidin 样（piscidin-like）抗菌肽（Antimicrobial peptide,AMP）。前期研究中,我们发现Pc-pis能快速杀伤肿瘤细胞。为了开发其在抗肿瘤方面的应用,我们通过以下几个方面,进行了初步的研究和探索。用化学合成的Pc-pis处理HeLa细胞,扫描电镜观察细胞死亡的形态特征。正常细胞表面上的绒毛数量较多且弯曲,细胞膜光滑完整,Pc-pis的处理使细胞形态变圆,细胞绒毛减少,细胞膜出现空洞。说明Pc-pis通过改变细胞膜的结构致使细胞死亡。利用配体/受体相互作用的细胞类型特异性结合,将抗菌肽运用到分子靶向治疗中。我们先进行了配体/受体相互作用分析。选取Mesothelin/MUC 16、尿激酶/受体和CD 47/SIRPα作为靶向传递系统,通过免疫共沉淀（Co-IP）证明了这三对分子可溶性片段能相互作用。前期工作中,我们发现抗菌肽Piscidin 1、Piscidin 3、Hb 26（pleurocidin家族）对肿瘤的杀伤作用与Pc-pis类似。由于抗菌肽具有毒性且分子量较小,因此难以异源表达,抗菌肽融合蛋白的表达和纯化一直是研究热点。我们设计了一种融合蛋白骨架,将AMP连接到由GST纯化标签、抗体铰链区、Thrombin、His标签和靶向配体组成的表达系统中,使其靶向肿瘤细胞表面的大分子,成功摸索到了表达条件,通过两步纯化得到了包含相应配体和AMP的融合蛋白,为开发AMP的临床应用提供了一定的理论基础。
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