奶牛乳房炎是由物理、化学或微生物等因素刺激奶牛乳腺所引发的一种炎症反应,其中多种病原微生物的感染是引起奶牛乳房炎的主要病因。该病广泛存在于世界各地,发病率较高,它不仅给世界奶牛养殖业带来了巨大的经济损失,也给乳品工业的发展、公共卫生安全以及食品安全带来一定隐患。奶牛乳房炎病原复杂,主要由病原菌感染引起,现已分离到的病原菌有150种以上,主要有葡萄球菌(多为金黄色葡萄球菌)、肠球菌(多为粪肠球菌)和链球菌(包括无乳链球菌、停乳链球菌、乳房链球菌)等等,所以给预防和治疗带来了较大困难。目前,发生乳房炎后一般采用抗生素进行治疗,弊端很多。其不仅引起产奶量下降甚至停奶,而且由于牛奶中长时间的残留抗生素,对人类健康造成危害。因此,急需寻找无残留的新型药物,卵黄抗体就是其中之一。蛋黄中的免疫球蛋白称为卵黄抗体,简称IgY,它是禽类血清中主要免疫球蛋白之一,IgY不仅可以和特异性抗原例如细菌、病毒、致癌物质以及毒素结合,并且能够中和抗原中的有害物质。在母鸡体内卵发育过程中,鸡血清中的IgG转移至蛋黄(卵细胞)中形成IgY,和哺乳动物中IgG进入胎盘相似,但鸡的免疫球蛋白取材更方便。本论文首先以兰州某奶牛场患临床型乳房炎的奶牛为试验对象,采集44份LMT阳性奶样,对其主要病原菌进行了分离鉴定及测定其耐药性。然后,采用分离到的主要致病菌--金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为混合抗原,免疫产蛋母鸡,制备了多价卵黄抗体并进行了特异性抗体的含量检测及抑菌试验,采用PEG-6000法结合冷乙醇法分离、纯化特异性卵黄抗体。抗体效价测定及体外抑菌试验分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)和液体培养基比浊法。试验结果如下:1.结果表明,导致该奶牛场临床型乳房炎的主要致病菌有葡萄球菌属、链球菌属、埃希氏菌属等,总共分离到细菌79株,其中金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌共35株,占44.3%;链球菌20株,占25.3%;大肠杆菌11株,占13.9%。说明引起该奶牛场临床型乳房炎主要致病菌为金黄色葡萄球菌、链球菌和大肠杆菌。药敏试验表明,这些细菌对乙酰螺旋霉素、新霉素、强力霉素、氟哌酸和阿莫西林等药物均高度敏感;对青霉素、链霉素和复方磺胺已经产生耐药性。2.获得多价抗体效价可达到4.71 log。体外抑菌试验表明,在菌浓度为103cfu/mL条件下显著抑制金黄色葡萄球和大肠杆菌的生长;液体培养基中抑菌检测,最小抑菌浓度为35mg/mL。本论文分离鉴定了该奶牛场临床型乳房炎的主要致病菌,成功制备出高活性特异性的卵黄抗体,并为该牛场临床型乳房炎的控制提供了一定的参考依据。