红枣色素与枣多糖协同保护小鼠肝细胞线粒体氧化损伤的作用

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肝脏担负着机体中多种重要和复杂的生理功能。但又极易受各种致病因素影响,而引起不同程度急性或慢性的肝损害。肝脏中富含的线粒体在氧化磷酸化时产生大量ROS可单独直接损伤线粒体,也可与其他影响线粒体功能的作用机制相互影响,引起线粒体氧化损伤和功能障碍而诱发疾病。红枣色素具有较强清除DPPH、·OH、O2-·和抗脂质过氧化能力,保护H2O2诱导的血管内皮细胞氧化损伤,且对缺氧小鼠和拘束应激肝损伤也有一定保护作用。红枣多糖具有很强清除·OH、O2-·、H2O2和抗脂质过氧化能力及稳定膜结构、促进淋巴细胞增殖等作用。前期研究已从活性成分、抗氧化活性与抗脂质过氧化、保护细胞损伤等方面对单一的红枣色素与枣多糖进行了探讨。在本实验中通过建立H2O2诱导小鼠肝细胞线粒体氧化损伤模型和CCl4诱导小鼠肝细胞线粒体氧化损伤动物模型。从体外、体内探讨红枣色素与枣多糖协同对肝细胞线粒体抗氧化酶活力、抗氧化物质含量、脂质过氧化水平、线粒体膜结构及功能的影响,评价红枣色素与枣多糖协同保护小鼠肝细胞线粒体氧化损伤的作用,并初步阐述其可能作用机制。实验结果如下:(1)红枣色素与枣多糖协同保护H202诱导小鼠肝细胞线粒体氧化损伤的作用。H2O2诱导小鼠肝细胞线粒体建立氧化损伤模型,通过测定T-AOC、SOD、GSH-Px、ATP酶、复合物Ⅰ、Ⅲ活力、MDA、GSH、总-SH、蛋白质羰基、CytC含量、线粒体膜通透性转换孔、线粒体膜电位及线粒体活力,评价红枣色素与枣多糖对小鼠肝细胞线粒体氧化损伤的保护作用。结果表明,以6.0 mmol/L H2O2处理小鼠肝细胞线粒体4 h建立小鼠肝细胞线粒体氧化应激损伤模型。红枣色素与枣多糖协同能明显降低小鼠肝细胞线粒体MDA、CytC含量(p<0.05),升高T-AOC、SOD、GSH-Px、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶、呼吸链复合物Ⅰ、Ⅲ和线粒体活力(p<0.05),增加GSH和总-SH含量(p<0.05),抑制线粒体膜通透性转换孔开放和线粒体膜电位降低(p<0.05),说明红枣色素与枣多糖复配具有良好的缓解H202诱导小鼠肝线粒体氧化损伤协同作用。(2)红枣色素与枣多糖协同保护CC14诱导小鼠肝细胞线粒体氧化损伤的作用。腹腔内注射CC14建立小鼠肝损伤模型。通过测定小鼠血清ALT、AST活力、小鼠体重、肝脏脏器指数和水分含量,小鼠肝组织、肝细胞线粒体T-AOC、SOD、GSH-Px活力、MDA、GSH含量;小鼠肝细胞线粒体ATP酶、复合物Ⅰ、Ⅲ活力、MDA、GSH、总-SH、蛋白质羰基、CytC含量、线粒体膜通透性转换孔、线粒体膜电位与线粒体活力,评价红枣色素与枣多糖保护小鼠肝细胞线粒体氧化损伤的协同作用。结果表明,红枣色素与枣多糖协同能显著降低小鼠血清ALT、AST活力(p<0.05),抑制小鼠肝组织、肝细胞线粒体MDA产生,提高小鼠肝组织、肝细胞线粒体T-AOC、SOD、GSH-Px活性,增加GSH含量(p<0.05);增强小鼠肝细胞线粒体Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2--ATP酶、线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅲ活力(p<0.05);逆转总-SH含量降低,抑制蛋白质羰基增加和线粒体膜通透性转换孔开放,改善线粒体膜电位和线粒体活力下降,减少CytC释放(p<0.05)。表明红枣色素与枣多糖具有一定协同保护CC14诱导小鼠肝细胞线粒体氧化损伤的效应。
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