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目的:⑴评价肥胖对多囊卵巢综合征(PCOS)患者体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗经过与结局的影响。⑵探讨PCOS患者与正常排卵妇女子宫内膜脂联素(APN)及其受体表达的差异。⑶比较PCOS患者与正常排卵的不孕患者卵巢颗粒细胞脂联素受体1和2(AdipoR1/2)的表达,卵泡液APN,TNF-α和IL-6相互之间及其与胚胎质量的关系,探讨APN在PCOS发病机制中的作用。
方法:①选择因合并输卵管阻塞和(或)男性因素需接受IVF-ET治疗PCOS患者125例。根据BMI研究分层法分为4组:A组<20kg/m229例,B组20-22.9kg/m252例,C组23-24.9kg/m224例,D组≥25kg/m220例。比较不同BMI的PCOS患者基本临床资料和妊娠结局。②选择BMI<25kg/m2的PCOS患者和正常排卵的患者各10例,收集D10-12子宫内膜。通过蛋白印迹和实时定量PCR等方法测定子宫内膜脂联素及其受体1和2表达。③选择因合并输卵管阻塞和(或)男性因素需接受IVF-ET治疗的BMI<25kg/m2的PCOS患者和正常排卵的患者各10例。通过ELISA方法测定卵泡液脂联素,TNF-α和IL-6水平,实时定量PCR法测定卵巢颗粒细胞中脂联素受体1和2的表达。
结果:⑴D组(BMI≥25kg/m2)患者用药天数与A组(BMI<20kg/m2)和B组(BMI20-22.9kg/m2)相比显著增加(P<0.05)。C组(BMI23-24.9kg/m2)和D组患者促性腺激素用量与A组相比显著增加(P<0.05)。获卵数D组者组患者与A患相比显著减少(P<0.05)。有效胚胎数D组与A,B,C三组相比显著减少。D组患者临床妊娠率显著低于A组(P=0.044);流产率四组间无显著差异;D组患者活产率显著低于A组(P/=0.009)。⑵蛋白印迹结果显示,PCOS组与对照组子宫内膜APN表达无差异,两组患者的子宫内膜均有微弱的AdipoR1及AdipoR2表达。实时定量PCR结果显示,PCOS与对照组相比,APN、AdipoR1及AdipoR2 mRNA表达均无显著差异(P>0.05)。 AdipoR1与AdipoR2 mRNA表达相比,PCOS组AdipoR1与AdipoR2无显著差异;对照组AdipoR2表达显著低于AdipoR1(P<0.05)。⑶PCOS组与对照组相比,卵泡液内APN水平无显著差异。PCOS组卵泡液TNF-α与IL-6水平相互之间显著正相关,与受精率和胚胎质量显著负相关。PCOS组与对照组相比,颗粒细胞中AdipoR1及AdipoR2mRNA表达无显著差异(P>0.05)。AdipoR1与AdipoR2 mRNA表达相比,PCOS组无,显著差异,而对照组AdipoR2表达显著低于AdipoR1(P<0.05)
结论:①随着PCOS患者BMI的增加,促性腺激素使用量增加、用药时间延长,获卵数减少,有效胚胎数减少,临床妊娠率及活产率显著降低。建议肥胖的PCOS患者进入IVF周期前,先将BMI控制在25 kg/m2以下,可以降低治疗费用并提高累计成功率。②脂联素及其受体1和2在BMI<25kg/m2的PCOS患者和正常排卵妇女增生期子宫内膜均有表达且无显著差异,提示体重正常的PCOS患者子宫内膜无脂联素及受体水平表达异常。正常排卵妇女子宫内膜AdipoR2表达显著低于AdipoR1,PCOS患者子宫内膜两种受体无明显差异,提示PCOS患者子宫内膜AdipoR2水平相对上调,脂联素可能通过AdipoR2的调节影响PCOS患者子宫内膜的功能。③BMI<25kg/m2的PCOS患者与正常排卵妇女卵泡液APN水平无差异;PCOS患者的受精率和胚胎质量受卵泡液IL-6、TNF-α水平的影响。PCOS患者与正常排卵妇女相比,AdipoR1及AdipoR2 mRNA表达差异均无显著差异,提示正常体重的PCOS患者颗粒细胞无脂联素受体基因水平表达异常。正常排卵妇女颗粒细胞AdipoR2表达显著低于AdipoR1,PCOS颗粒细胞两种受体无显著差异,因此推测PCOS患者颗粒细胞AdipoR2水平相对上调,脂联素可能通过AdipoR2的调节影响PCOS患者颗粒细胞的功能。