多囊卵巢综合征患者子宫内膜和卵巢颗粒细胞脂联素及其受体表达的研究

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目的:⑴评价肥胖对多囊卵巢综合征(PCOS)患者体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗经过与结局的影响。⑵探讨PCOS患者与正常排卵妇女子宫内膜脂联素(APN)及其受体表达的差异。⑶比较PCOS患者与正常排卵的不孕患者卵巢颗粒细胞脂联素受体1和2(AdipoR1/2)的表达,卵泡液APN,TNF-α和IL-6相互之间及其与胚胎质量的关系,探讨APN在PCOS发病机制中的作用。 方法:①选择因合并输卵管阻塞和(或)男性因素需接受IVF-ET治疗PCOS患者125例。根据BMI研究分层法分为4组:A组<20kg/m229例,B组20-22.9kg/m252例,C组23-24.9kg/m224例,D组≥25kg/m220例。比较不同BMI的PCOS患者基本临床资料和妊娠结局。②选择BMI<25kg/m2的PCOS患者和正常排卵的患者各10例,收集D10-12子宫内膜。通过蛋白印迹和实时定量PCR等方法测定子宫内膜脂联素及其受体1和2表达。③选择因合并输卵管阻塞和(或)男性因素需接受IVF-ET治疗的BMI<25kg/m2的PCOS患者和正常排卵的患者各10例。通过ELISA方法测定卵泡液脂联素,TNF-α和IL-6水平,实时定量PCR法测定卵巢颗粒细胞中脂联素受体1和2的表达。 结果:⑴D组(BMI≥25kg/m2)患者用药天数与A组(BMI<20kg/m2)和B组(BMI20-22.9kg/m2)相比显著增加(P<0.05)。C组(BMI23-24.9kg/m2)和D组患者促性腺激素用量与A组相比显著增加(P<0.05)。获卵数D组者组患者与A患相比显著减少(P<0.05)。有效胚胎数D组与A,B,C三组相比显著减少。D组患者临床妊娠率显著低于A组(P=0.044);流产率四组间无显著差异;D组患者活产率显著低于A组(P/=0.009)。⑵蛋白印迹结果显示,PCOS组与对照组子宫内膜APN表达无差异,两组患者的子宫内膜均有微弱的AdipoR1及AdipoR2表达。实时定量PCR结果显示,PCOS与对照组相比,APN、AdipoR1及AdipoR2 mRNA表达均无显著差异(P>0.05)。 AdipoR1与AdipoR2 mRNA表达相比,PCOS组AdipoR1与AdipoR2无显著差异;对照组AdipoR2表达显著低于AdipoR1(P<0.05)。⑶PCOS组与对照组相比,卵泡液内APN水平无显著差异。PCOS组卵泡液TNF-α与IL-6水平相互之间显著正相关,与受精率和胚胎质量显著负相关。PCOS组与对照组相比,颗粒细胞中AdipoR1及AdipoR2mRNA表达无显著差异(P>0.05)。AdipoR1与AdipoR2 mRNA表达相比,PCOS组无,显著差异,而对照组AdipoR2表达显著低于AdipoR1(P<0.05) 结论:①随着PCOS患者BMI的增加,促性腺激素使用量增加、用药时间延长,获卵数减少,有效胚胎数减少,临床妊娠率及活产率显著降低。建议肥胖的PCOS患者进入IVF周期前,先将BMI控制在25 kg/m2以下,可以降低治疗费用并提高累计成功率。②脂联素及其受体1和2在BMI<25kg/m2的PCOS患者和正常排卵妇女增生期子宫内膜均有表达且无显著差异,提示体重正常的PCOS患者子宫内膜无脂联素及受体水平表达异常。正常排卵妇女子宫内膜AdipoR2表达显著低于AdipoR1,PCOS患者子宫内膜两种受体无明显差异,提示PCOS患者子宫内膜AdipoR2水平相对上调,脂联素可能通过AdipoR2的调节影响PCOS患者子宫内膜的功能。③BMI<25kg/m2的PCOS患者与正常排卵妇女卵泡液APN水平无差异;PCOS患者的受精率和胚胎质量受卵泡液IL-6、TNF-α水平的影响。PCOS患者与正常排卵妇女相比,AdipoR1及AdipoR2 mRNA表达差异均无显著差异,提示正常体重的PCOS患者颗粒细胞无脂联素受体基因水平表达异常。正常排卵妇女颗粒细胞AdipoR2表达显著低于AdipoR1,PCOS颗粒细胞两种受体无显著差异,因此推测PCOS患者颗粒细胞AdipoR2水平相对上调,脂联素可能通过AdipoR2的调节影响PCOS患者颗粒细胞的功能。
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