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目的:本实验采用CORT诱导损伤PC12细胞模型,以及C6神经胶质瘤细胞模型,通过CCK-8法检测细胞存活率、检测LDH释放率、检测细胞内ROS水平、观察细胞形态变化、荧光染色、划痕实验、WB等试验方法,研究天麻多糖及其硫酸酯化物的神经保护作用和机制,并探索了硫酸酯化天麻多糖的抗肿瘤活性。为将天麻多糖开发成一种新型的、安全有效的神经保护的天然药物提供了相应的理论基础;同时,也为寻找硫酸酯化天麻多糖新的生物活性指明了方向。方法:对于天麻多糖及其酯化物的神经保护研究,采用CORT诱导损伤PC12细胞模型,实验分为正常对照组、CORT损伤组(200μMCORT)、低浓度组(200μM CORT+250μg/ml GEP/GEPs)、中浓度组(200μM CORT+500μg/ml GEP/GEPs)和高浓度组(200μMCORT+1000μg/mlGEP/GEPs)。实验给药时,正常对照组换上空白培养基,CORT损伤组换上含有200μMCORT的空白培养基,其他分组先用相应浓度的天麻多糖和硫酸酯化天麻多糖孵育30 min。采用CCK-8法检测细胞存活率,检测细胞LDH释放量,检测细胞内ROS水平,Hoschst33258/PI双染法检测细胞凋亡,ER荧光染色和WB检测细胞中GRP78、XBP-1、GADD153、caspase9和caspase12的表达量,以探究天麻多糖的神经保护活性机制。采用CCK-8法检测细胞存活率,检测细胞LDH释放量,观察细胞形态学变化,DAPI荧光染色和WB检测细胞中BAX和Bcl-2的表达量,以探究硫酸酯化天麻多糖的神经保护作用。对于硫酸酯化天麻多糖抑制神经胶质瘤细胞生长作用的活性研究,将实验分为正常对照组、0.1 mg/ml GEPs组、0.25 mg/ml GEPs组、0.5 mg/ml GEPs组、1 mg/ml GEPs组、1.5 mg/ml GEPs组。采用CCK-8法检测细胞存活率,观察细胞形态变化、DAPI荧光染色和划痕实验。结果:天麻多糖的预处理使PC12细胞存活率上升,LDH释放率下降,细胞内的ROS水平降低,细胞凋亡数下降,ER形态染色的荧光强度减弱,且WB检测结果显示 PC12 细胞中的 GRP78、XBP-1、GADD153、caspase9 和 caspase12 的表达水平经CORT诱导损伤后均显著上升(p<0.01),但天麻多糖的预处理有效降低了这些蛋白的表达量。硫酸酯化天麻多糖的预处理,同样使PC12细胞存活率上升,LDH释放量下降,同时WB检测结果显示,PC12细胞中的Bcl-1/BAX因CORT作用而升高,而硫酸酯化天麻多糖降低了这一蛋白比例。最后,硫酸酯化天麻多糖降低了 C6细胞的存活率,使C6细胞凋亡,能有效抑制C6细胞的迁移,并且呈现出浓度依赖关系。结论:天麻多糖对CORT诱导损伤PC12细胞的保护作用是通过抑制内质网应激通路实现的。硫酸酯化天麻多糖对CORT诱导损伤PC12细胞也具有一定的保护作用,但与天麻多糖相比,此保护作用没有显著提高。最后,发现硫酸酯化天麻多糖具有抑制神经胶质瘤细胞生长的活性,并可有效抑制神经胶质瘤细胞的迁移。