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本实验为山东省教育厅课题：课题编号-J05L05。目的：研究表明,原发性高血压与内皮细胞功能障碍有关。理想的抗高血压药物除降低血压外,还应具有改善高血压血管结构和功能,逆转动脉重塑,保护内皮细胞功能和保护靶器官的作用。钩藤为临床治疗高血压病的常用药物,钩藤的有效组分钩藤总生物碱有高生物活性,有较好的降压作用,其降压机制尚不明确。以往研究表明钩藤总生物碱通过抗高血压血管重塑、抑制血管平滑肌细胞增殖的途径来降血压,通过抑制内皮细胞衰老降压这一领域尚未涉及。本研究通过探索钩藤总生物碱抗高血压血管重塑、保护内皮细胞结构功能、抑制血管内皮细胞衰老的作用及其机制,试图开辟其抑制内皮细胞衰老----保护内皮细胞功能—逆转血管重塑—降低血压、保护靶器官这一防治高血压的新途径。方法：在体实验以自发性高血压大鼠(SHR)为模型,观察钩藤总生物碱对SHR尾动脉血压的影响；对大鼠胸主动脉、肠系膜动脉组织学和体视学变化的影响；对大鼠胸主动脉内皮超微结构的影响；对大鼠胸主动脉内皮β-半乳糖苷酶表达和端粒酶活性相对表达量的影响。以研究钩藤总生物碱降血压、改善血管重塑的效果及可能的机制。离体实验分别建立培养以AngⅡ诱导增殖和D-半乳糖诱导衰老的大鼠胸主动脉内皮细胞(RAEC)模型,MTT法观察钩藤总生物碱对RAEC增殖活度的影响；免疫组织化学法观察其对RAEC Ca2+浓度相对表达值的影响；流式细胞仪观察其对RAEC细胞周期的影响；扫描电镜观察其对RAEC超微结构的影响；β-半乳糖苷酶染色显示其对RAEC衰老阳性率的影响；PCR-ELISA法检测其对RAEC端粒酶活性的影响；流式细胞仪观察其对衰老RAEC凋亡的影响,以研究钩藤总生物碱抑制AngⅡ诱导的RAEC增殖、抑制D-半乳糖诱导的RAEC衰老及其促衰老RAEC凋亡的作用及可能机制。结果：在体实验表明钩藤总生物碱可以降低SHR尾动脉血压,与模型组相比有非常明显差异(P<0.01)；钩藤总生物碱组大鼠胸主动脉、肠系膜动脉中膜厚度／管腔直径的比值与模型组比较均明显降低(P<0.05)；各组胸主动脉内皮扫描电镜观察结果与模型组比较,钩藤总生物碱组内皮形态结构均有明显改善,表现在内皮细胞排列整齐,表面光滑,内皮细胞脱落明显减少,内膜损伤明显减轻；钩藤总生物碱组大鼠胸主动脉内皮β-半乳糖苷酶表达与模型组比较均明显降低(P<0.05)；钩藤总生物碱组大鼠胸主动脉内皮端粒酶活性相对表达量与模型组比较均明显降低(P<0.05)。离体实验：MTT实验表明血管紧张素Ⅱ具有明显促进RAEC增殖作用,钩藤总生物碱能抑制血管紧张素Ⅱ诱导的RAEC增殖；钩藤总生物碱组RAEC Ca2+浓度相对表达值明显降低(P<0.05)；细胞周期研究发现钩藤总生物碱组与诱导增殖组相比,G1期增高(P<0.05),S期明显降低(P<0.01),可见钩藤总生物碱可以阻断细胞由Go／Gl期向DNA合成的S期转化,从而抑制培养的RAEC衰老的作用；RAEC超微结构电镜扫描表明与D-gal诱导衰老组比较,钩藤总生物碱组的RAEC形态结构如细胞形态、大小及微绒毛数量、分布均有明显改善；β-半乳糖苷酶染色表明,D-半乳糖具有明显诱导RAEC衰老的作用,钩藤总生物碱组β-半乳糖苷酶表达的衰老细胞阳性率较D-半乳糖诱导衰老组非常明显降低(P<0.01)；钩藤总生物碱组端粒酶活性检测与模型组比较均明显降低(P<0.05)；钩藤总生物碱可以显著促进衰老内皮细胞的凋亡(P<0.05)。结论：研究表明钩藤总生物碱可以显著降低SHR尾动脉血压,有明显的降血压的作用；具有明显的改善、逆转高血压血管重塑的效应；具有明显改善血管内皮结构和功能,保护血管内皮的功能；具有明显抑制血管内皮衰老的作用。钩藤总生物碱可抑制AngⅡ的促RAEC增殖效应,对D-半乳糖介导的RAEC衰老具有明显的抑制作用,可明显改善RAEC结构和功能,降低衰老细胞阳性率和端粒酶活性,有显著的抑制RAEC衰老的作用,有明显的促进衰老的RAEC凋亡的作用。