盾壳霉(Coniothyrium minitans)是核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)的重寄生真菌，在世界范围内广泛分布，在菌核病的生物防治中有着非常重要的作用。真菌病毒CmRV是来自盾壳霉菌株Chy-1的dsRNA病毒，它的全长基因组的序列已被测序完成，属于Totiviridae(全病毒)科，对寄主没有显著的影响。本研究中采用反向遗传学技术对CmRV进行研究，通过分段RT-PCR的方法分别克隆了病毒基因组的5′端和3′端cDNA片段，连接pMD18-T得到病毒全长cDMA的亚克隆，再构建全长克隆的方法得到了含有全长cDNA克隆的重组质粒。在研究过程中发现于2003年测定并提交的CmRV全序列多出了21个碱基，CmRV实际大小为4954nt。由于这21个碱基在3′端的非翻译区，因此并不影响CmRV的分类地位和对其所表达的外壳蛋白(CP)和依赖RNA的RNA聚合酶(RdRP)的推定。通过酶切得到了CmRV全长基因组cDNA片段，连入p1301-V的构巢曲霉的trpC启动子下游的多克隆位点，得到了全长cDNA的正向表达转化载体pCmRV-cDNA(+)和反向表达转化载体pCmRV-cDNA(-)；将构建好的载体通过热击转化导入农杆菌EHA105菌株，通过农杆菌介导转化技术(ATMT)成功转化盾壳霉ZS-1菌株。对转化子的PCR检测分析表明病毒基因组已经整合到盾壳霉ZS-1的染色体上，RT-PCR检测表明病毒的基因在转化子细胞内正常转录，但是在转化子和正、反向转化子的菌丝融合子代中都没有检测到CmRV核酸的存在。对正、反向转化子的生物学特性分析表明，转化子的表型在菌落形态、产孢能力和对菌核的寄生致腐能力上都没有显著变化(个别除外)，确认了CmRV对寄主不存在显著的影响。