【摘 要】
：
开花是植物生长发育过程中关键的一环,植物的开花受到多个途径的调控。开花抑制基因TERMINAL FLOWER 1（TFL1）是花分生组织特异性基因,在多个物种中发现,可与其他基因相互作用从而调控开花。但是,目前芒果TFL1基因的功能以及调控机制尚未见报道。本研究以一年多次开花结果的‘四季蜜芒’和一年一次开花结果的‘台农一号芒’为主要试验材料,通过分析芒果MiTFL1s基因家族的表达模式、启动子元件
【基金项目】
：
国家自然科学基金项目（31860541）《芒果FT基因在成花过程中的分子机制研究》；
论文部分内容阅读
开花是植物生长发育过程中关键的一环,植物的开花受到多个途径的调控。开花抑制基因TERMINAL FLOWER 1（TFL1）是花分生组织特异性基因,在多个物种中发现,可与其他基因相互作用从而调控开花。但是,目前芒果TFL1基因的功能以及调控机制尚未见报道。本研究以一年多次开花结果的‘四季蜜芒’和一年一次开花结果的‘台农一号芒’为主要试验材料,通过分析芒果MiTFL1s基因家族的表达模式、启动子元件、基因功能和筛选互作蛋白等,初步揭示了4个MiTFL1s基因在芒果成花中的功能。结果如下:1、本研究从芒果转录组数据中获得了4个TFL1s同源基因,分别命名MiTFL1-1、MiTFL1-2、MiTFL1-3和MiTFL1-4。并且成功从‘四季蜜芒’和‘台农一号芒’中克隆且得到了4个MiTFL1s基因的DNA及c DNA全长,‘四季蜜芒’的4个MiTFL1s基因的DNA全长分别为1175 bp、1054 bp、962 bp、1299 bp;‘台农一号芒’的4个MiTFL1s基因的DNA全长分别为1175 bp、1054 bp、973 bp、1304 bp。4个MiTFL1s基因在‘四季蜜芒’和‘台农一号芒’中的DNA序列结构均含有4个外显子和3个内含子。两个品种的4个MiTFL1s基因区编码区序列长度相同,分别为:516 bp、525 bp、519 bp、510 bp,分别编码172、175、173、170个氨基酸。MiTFL1-1和MiTFL1-2在两个品种中氨基酸序列完全相同;MiTFL1-3基因有一个氨基酸的差异;MiTFL1-4基因有两个氨基酸的差异。4个基因对应的氨基酸序列都包含区分TFL1蛋白高度保守的关键氨基酸残基His 88、Asp 144,且这4个基因在进化树中均属于TFL1/CEN分支。2、‘四季蜜芒’和‘台农一号芒’的4个MiTFL1s基因的组织表达模式均类似,在茎中表达量最高,在童期的叶片组织中表达量次之,在成熟叶中表达量较低,在花中表达量最低。在芒果叶片中,4个MiTFL1s基因的成花不同发育时期表达模式存在差异,MiTFL1-1、MiTFL1-2和MiTFL1-3基因在成花诱导期和花器官发育末期表达量较高,而在营养生长期、成花诱导末期和开花期表达量较低;而MiTFL1-4在营养生长期和成花诱导末期表达量较高,其他时期表达量较低;并且MiTFL1-2和MiTFL1-3基因在两个品种中的表达模式也存在差异。同时对‘四季蜜芒’一年生嫁接苗喷施激素可影响MiTFL1s基因的表达,喷施赤霉素可促进MiTFL1-1、MiTFL1-3和MiTFL1-4基因在12月21日的表达,喷施多效唑可抑制此时期它们的表达。但是经过赤霉素或多效唑处理后,MiTFL1-2基因表达量在这一时期均降低。3、采用TAIL-PCR法,从‘四季蜜芒’、‘台农一号芒’、‘凯特’、‘金煌’和‘南逗迈’五个品种中克隆并且得到了MiTFL1-2、MiTFL1-3（无南逗迈）和MiTFL1-4基因约1800-2000 bp的启动子序列,同基因品种之间启动子差异较小,而在不同的MiTFL1s基因之间序列差异明显。在‘四季蜜芒’的MiTFL1s基因的启动子中,含有大量的TATA-BOX和CAAT-BOX元件,另外还含有与光相关元件、激素响应元件、逆境相关元件、糖抑制相关元件以及基因结合元件等。4、通过花序浸染法成功获得转基因株系,得到超量表达MiTFL1-1基因的植株为32株、MiTFL1-2基因为68株、MiTFL1-3基因为44株和MiTFL1-4基因为25株。经T3代纯合株系表型鉴定可知:4个MiTFL1s基因过表达后均可以使野生型拟南芥开花时间推迟,MiTFL1-1和MiTFL1-3转基因可使植株的花和茎发生变异。MiTFL1-2推迟开花时间最长,比wild-type（野生型）和转p BI121空载植株晚6-11天左右,其次是MiTFL1-3推迟4-10天左右,接下来是MiTFL1-1推迟4-8天左右,最后是MiTFL1-4推迟2-5天左右。5、通过酵母双杂交技术筛选4个MiTFL1s基因的互作蛋白,MiTFL1-1蛋白得到了47个候选蛋白;MiTFL1-2蛋白得到了46个;MiTFL1-3蛋白得到了21个;MiTFL1-4蛋白得到了16个。通过分析这些候选蛋白的作用及功能后,选择出现次数较多或与开花、逆境相关的38个候选蛋白进行后续验证,其中MiTFL1-1相关候选蛋白有13个;MiTFL1-2有16个;MiTFL1-3有6个;MiTFL1-4有3个。通过一对一互作验证得到16个与4个MiTFL1s蛋白互作的蛋白,它们可与一个或多个MiTFL1s相互作用。其中与MiTFL1-1互作的蛋白共有9个;与MiTFL1-2互作的蛋白共有7个;与MiTFL1-3互作的蛋白共有6个;与MiTFL1-4互作的蛋白共有7个。
其他文献
内质网是真核细胞中分泌性蛋白折叠加工和运输过程中的重要细胞器。来自细胞内外的多种因素可引起错误折叠或未折叠的蛋白质在内质网中积累，导致内质网结构和功能异常，称之为内质网应激（ERS）。内质网自噬是缓解ERS的重要内生机制，常被认为是一种细胞保护性程序，参与代谢、免疫应答、炎症反应及细胞增殖等多种重要的生理过程，其通过清除冗余、失能的内质网以及大体积的蛋白复合体，恢复内质网稳态，对细胞的命运至关重要
目的 探讨二甲双胍联合屈螺酮炔雌醇片（Ⅱ）治疗多囊卵巢综合征（PCOS）的临床效果。方法 选取我院2018年5月至2021年5月收治的80例PCOS患者作为研究对象，随机将其分为对照组和观察组，各40例。对照组给予屈螺酮炔雌醇片（Ⅱ）治疗，观察组给予屈螺酮炔雌醇片（Ⅱ）+二甲双胍治疗。比较两组的治疗效果、激素水平、糖脂代谢指标、子宫内膜厚度及卵巢血流情况。结果 观察组的治疗总有效率高于对照组（P＜
甘蔗梢腐病可由多种镰刀菌引起,近年来在我国主要蔗区呈明显上升趋势,对甘蔗生产造成严重威胁。选育抗病品种是防治甘蔗梢腐病最有效的方法,但目前对该病害的机制及抗病基因挖掘研究较少,尚难以进行抗病分子标记辅助育种。本研究的思路是通过构建ROC25×云蔗89-7杂交F1代大规模遗传群体,从中筛选极端抗梢腐病和感梢腐病材料,构建了抗/感梢腐病亚群体。通过对群体进行形态学特征进行调查分析,找出抗/感群体的形态
农业科技园区作为农业科技成果转化的重要载体,对推动农业经济发展、促进农民增收、实现农业科学技术创新等方面发挥着重要作用。本文以南宁市前两批农业科技园区为研究对象,通过评价园区绩效,分析各园区的问题瓶颈,从而针对性地探讨提出解决之道,对促进南宁市乃至广西农业科技园区发展,推动园区提质增效具有重要的现实意义。本文通过实地走访南宁市三大园区获取相关数据,数据显示南宁市农业科技园区运营状况良好,园区总产值
水稻生产方式是指水稻生产的方法及其组织管理形式,它随着社会生产力和生产关系的发展而不断变化。在加快发展农业现代化的背景下,研究广西水稻生产方式变革及其动力,对于当前及未来广西水稻生产的发展都具有重要的指导意义。因此,论文以广西水稻生产为研究对象,通过文献检索法、比较分析法以及实地调研法,以时间为主线,梳理广西水稻生产的发展历程,剖析水稻生产方式发展变化及其影响因素。主要研究结果如下:广西水稻生产发
柑橘黄龙病（Citrus Huanglongbing）是世界柑橘（Citrus reticulata Blanco）生产上的毁灭性病害,植株一但染病无有效药剂防治,只能挖除销毁。中国19个柑橘生产省（市、自治区）中已有11个受到该病危害,严重制约柑橘产业的健康发展。本研究以长春花（Catharanthus roseus）为试验材料,通过盆栽试验,研究丛枝菌根（Arbuscular mycorrhi
背景：神经元的自噬功能紊乱和异常蛋白质聚集是神经退行性疾病的主要病理改变，间充质干细胞与自噬的联系及其相互作用代表一种治疗神经退行性疾病可能的机制。目的：围绕自噬与间充质干细胞治疗神经退行性疾病及其相互作用的研究进展进行综述，旨在为治疗神经退行性疾病提供理论依据和新思路。方法：在PubMed和中国知网数据库以“autophagy,neurodegenerative diseases,mesench
隐身性能是影响高超声速武器作战效能的关键指标之一。近年来探测反导技术的发展对高超声速飞行器的生存以及突防构成了重大威胁,因此需提出一种兼具良好隐身特性的气动外形,为工程应用提供有价值的参考。本文以HTV-2飞行器外形为研究对象,采用CFD数值模拟和高频近似算法,对其气动特性及隐身特性进行评估。接着,基于类HTV-2外形,采用截取重要截面轮廓线,均匀选取控制点并重构成三维外形的方法,获得一种锐边化飞
芒果（Mangifera indica L.）是漆树科多年生木本果树,其较长的童期严重制约了芒果新品种的选育进程。FD基因在植物成花调控网络中具有重要的作用,而目前在芒果中还未有FD基因的研究报道。‘四季蜜芒’（Mangifera indica L.cv.‘Si Ji Mi’）具有一年多次花的特点,是研究芒果成花的独特材料。前期研究中,课题组通过高通量转录组测序从‘四季蜜芒’中挖掘获得了大量的成花
CONSTANS-like（COL）基因在植物开花调节中起重要作用。课题组前期研究发现芒果中存在4种类型的CO/COL基因,本研究主要对第Ⅳ类CO基因进行研究,以四季蜜芒（Mangifera indica L.cv.‘Si Ji Mi’）为材料,通过基因克隆、表达模式分析和转基因功能分析来研究芒果CONSTANS-like（Mi COL）Ⅳ类基因在芒果成花和逆境中的作用,主要结果如下:1.克隆获得