ABC转运蛋白在水稻籽粒微量元素积累中的作用初步研究

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微量元素在生物体正常生命活动中起重要作用,提高稻米铁、锌等微量元素含量对人类健康有重要意义。课题组前期对有色稻品系“罗田红米”叶面喷施Fe SO4后显著提高了籽粒铁含量,同时也促进籽粒中锌等其它微量元素含量提高,但其调节机制尚不清楚。本研究用两种籽粒铁含量差异的水稻材料“罗田红米”、9311为材料,结合Fe SO4、Zn SO4叶面喷施处理进行了籽粒发育过程中铁、锌、铜、锰、镉积累量和TMT定量蛋白质组学分析ABC转运蛋白表达及q RT-PCR验证,初步明确了水稻ABC转运蛋白和籽粒微量元素积累密切相关,获得结果如下:1.基于火焰原子吸收光谱法和TMT定量蛋白质组学分析测定了罗田红米和白米9311成熟糙米中铁、锌、铜、锰元素含量,罗田红米铁含量是白米9311的3.9倍,锰含量是白米9311的1.8倍。罗田红米灌浆中期(开花后10~15 d)籽粒中特异高表达的ABC转运蛋白成员有ABCB19、ABCB25、ABCB26、ABCC2、ABCC10和ABCC13,其中ABCB19、ABCB25、ABCC2和ABCC10在灌浆中期持续高表达,是9311的1.08~1.47倍。2.叶面喷施0.1%Fe SO4的罗田红米成熟糙米中铁含量增长65.2%,锌、铜和锰含量分别增加19.7%、20.7%和37.6%,镉含量增长5.4%;喷施0.1%Fe SO4和0.1%Zn SO4混合液后,糙米中铁含量大幅增长128.6%,锌、铜和锰含量分别增加43.5%、40.3%和106.5%,镉含量下降了10.3%。叶面喷施铁、锌微肥有效提高了罗田红米籽粒中铁、锌元素的含量,糙米铁、锌含量提高至34.8~48.2 mg/kg、30.5~36.6mg/kg,所测定的各金属元素含量强化后仍未超出食用安全限值范围。3.叶面喷施不同0.1%Fe SO4、0.1%Zn SO4处理后罗田红米灌浆籽粒中ABC转运蛋白的表达差异:喷施0.1%Fe SO4诱导灌浆中期(开花后10~15 d)籽粒ABCB19、ABCB25、ABCB26、ABCC2、ABCC10、ABCC13蛋白表达量上调1.1%~28.3%;喷施0.1%Fe SO4和0.1%Zn SO4混合液诱导灌浆中期(开花后10~15d)籽粒ABCB19、ABCB25、ABCC2、ABCC10、ABCC13蛋白表达量上调0.4%~11.4%。5个ABC转运蛋白ABCB19、ABCB25、ABCC2、ABCC10和ABCC13特异响应了叶面喷施不同Fe SO4、Zn SO4溶液处理,且采用q RT-PCR方法验证了ABCB和ABCC等成员基因表达特征,解析了ABC转运蛋白在水稻籽粒微量元素的积累和调控过程中起着重要作用。综上所述,通过籽粒铁素含量不同的两种基因型材料比较分析及叶面喷施处理结果,均初步证实ABC转运蛋白在籽粒富铁特征形成和二价微量金属元素含量调节方面具重要功能。通过叶面喷施微肥可以有效提高水稻籽粒中铁、锌等微量元素含量且符合人体食用的安全范围,是一种有应用潜力的强化营养、优质栽培的调节方法。
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