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冷冻保存绒山羊精液对提高种公羊的利用效率,加快品质改良和控制疾病的发展具有举足轻重的作用。目前,使用液氮保存的山羊精子,经解冻后精子结构和功能发生严重的改变,使得山羊精液冷冻保存效果还不够理想。冷冻-解冻后,精子活率、质膜完整率、顶体完整率等品质均不如鲜精。因此,探究提高冷冻-解冻后精子质量的技术尤为重要。本研究以绒山羊精液为研究对象,在冷冻稀释液中添加不同浓度的抗氧化剂,通过研究不同抗氧化剂对精液冷冻保存效果的影响,为提高绒山羊精液冷冻保存效果奠定理论基础。内容如下:1.褪黑素(Melatonin,MLT)对绒山羊精液冷冻品质的影响。为提高绒山羊精液冷冻保存效果,在冷冻稀释液中添加不同浓度的MLT,并采用计算机辅助精液分析系统(CASAS)和流式细胞仪分别检测解冻后精子运动参数、精子活率、质膜完整率、顶体完整率、DNA完整率、线粒体膜电位和ROS水平。结果表明:冷冻稀释液中添加0.5 mg/mL的褪黑素,精液解冻后精子活率、质膜完整率、顶体完整率、DNA完整率和线粒体膜电位分别为52.7%、45.8%和77.9%、95.1%和2.7,均显著高于对照组(分别为47.8%、36.27%、53.1%、93.5%和1.2,P﹤0.05);而且,与对照组相比,在冷冻稀释液中添加0.5 mg/mL的褪黑素能够显著降低精子细胞中ROS水平(P<0.05)。综上所述,在绒山羊精液冷冻稀释液中添加0.5 mg/mL的褪黑素,能显著提高绒山羊精液冷冻保存效果。2.辅酶Q10(Coenzyme Q10)对绒山羊精液冷冻保存效果的影响。在绒山羊精液冷冻稀释液中添加不同浓度的辅酶Q10(Coq10),并采用计算机辅助精液分析系统(CASAS)和流式细胞仪分别检测解冻后精子运动参数、精子活率、质膜完整率、顶体完整率、DNA完整率、线粒体膜电位和ROS水平。结果表明:冷冻稀释液中添加不同浓度的辅酶Q10,与对照组相比,冷冻解冻后精子质量均显著提高(P<0.05),而且当辅酶Q10浓度为400μg/mL时,精子活率为60.2%、ROS水平为1124、DNA完整率为93.6%;当辅酶Q10浓度为40μg/mL时,精子质膜完整率为63.0%、顶体完整率为76.5%、线粒体膜电位为2.9,均显著高于对照组(分别为47.8%、36.3%、53.1%、93.5%和1.2,P<0.05)。3.过氧化氢酶(Catalase)对绒山羊精液冷冻保存效果的影响。在绒山羊精液冷冻稀释液中添加不同浓度的过氧化氢酶(CAT),并采用计算机辅助精液分析系统(CASAS)和流式细胞仪分别检测解冻后精子运动参数、精子活率、质膜完整率、顶体完整率、DNA完整率、线粒体膜电位和ROS水平。结果表明:在冷冻稀释液中添加CAT浓度为300 U/mL时,精子活率为58.3%、DNA完整率为96.2%、线粒体膜电位为3.4、细胞内ROS水平1414;当CAT浓度为200 U/mL时,精子质膜完整率为44.1%、顶体完整率为71.17%,均显著高于对照组(分别为47.8%、36.3%、53.1%、93.5%和1.2),(P<0.05)。