目的:基于文献数据库挖掘治疗类风湿关节炎的雷公藤-黄芪药对,并探索药对中有效成分(毛蕊异黄酮、雷公藤甲素)治疗胶原诱导关节炎小鼠的可能机制,为后期两个成分联合应用开发新药提供前期基础。方法:1.基于文献挖掘分析雷公藤—黄芪药对治疗类风湿关节炎的组方规律。(1)以“雷公藤”、“类风湿”、“试验”为关键词检索中国生物医学文献数据库1998-2018年所有临床处方;(2)通过中医传承辅助系统分析其配伍规律,挖掘出雷公藤—黄芪药对。2.黄芪有效成分之一毛蕊异黄酮通过调控M1型巨噬细胞治疗胶原诱导关节炎研究。(1)通过CCK-8细胞毒性实验、流式细胞仪检测毛蕊异黄酮对原代腹腔来源巨噬细胞和原代骨髓来源巨噬细胞的毒性。(2)利用实时定量PCR检测毛蕊异黄酮对炎症刺激下两种来源的原代巨噬细胞的炎症因子产生的影响。(3)高通量转录组测序寻找其可能作用信号通路,Western Blot检测毛蕊异黄酮能够抑制P65磷酸化,降低转录活性达到减轻炎症的目的。(4)毛蕊异黄酮能够有效改善胶原诱导关节炎小鼠症状评分。(5)ABOG、TRAP、Micro-CT显示毛蕊异黄酮能够有效改善胶原诱导关节炎小鼠骨与软骨的破坏,抑制滑膜增生,减少骨量丢失。(6)全自动生化分析仪检测肝肾生化指标(AST、ATL、CRE、BUN)变化。3.雷公藤有效成分之一雷公藤甲素纳米剂型改造治疗胶原诱导关节炎研究。(1)利用材料的亲疏水效应,将疏水性药物雷公藤甲素包裹进纳米粒子内部的疏水区域。(2)在亲水部分引入了具有p H响应性的聚甲基丙烯酸二甲氨基乙酯(PDMAEMA)。(3)通过动态光散射和透射电子显微镜检测纳米药物表征。(4)不同p H环境下,检测纳米药物体外释放效率。(5)CCK-8、流式细胞仪检测雷公藤甲素纳米药物对细胞凋亡的影响。(6)流式细胞仪检测雷公藤纳米剂型ROS活性产生。(7)实时定量PCR检测雷公藤纳米药物细胞水平抗炎效果。(8)利用小动物活体成像观察雷公藤纳米药物在小鼠关节处富集效率。(9)ABOG、TRAP、Micro-CT观察不同剂量雷公藤纳米药物对小鼠关节软骨破坏和滑膜增生的影响。(10)肝肾生化指标血清学检测AST、ATL、CRE、BUN指标变化。(11)HE染色观察雷公藤纳米药物对小鼠肝脏、肾脏及脾脏的影响。结果:1.探究出符合中医“扶正祛邪”理念的雷公藤—黄芪药对,为临床治疗类风湿关节炎提供配伍思路。2.明确黄芪有效成分之一毛蕊异黄酮有效改善胶原诱导关节炎小鼠关节炎症,其机制可能是通过调控M1型巨噬细胞,抑制P65磷酸化降低转录活性,达到抗炎的目的。3.针对雷公藤有效成分之一雷公藤甲素的理化性质,将其成功地进行剂型改造,在其机制明确的基础上,通过剂型改造增加疗效并有效降低毒性。结论:毛蕊异黄酮和雷公藤甲素能够治疗胶原诱导关节炎小鼠。