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炎症在心肌重构中起了重要的作用，特别是在心肌纤维化过程中。以往的研究表明，许多炎症刺激因子可触发转化生长因子-β(TGF-β)产生和促进心肌纤维化。激活素A（Activin A）是转化生长因子-β超家族成员，FS是一种激活素相关蛋白。我们先前的研究表明在心梗后心衰的实验大鼠中Activin A-FS表达失衡，高表达的Activin A可导致心梗后心室重构发生心衰，FS作为Activin A拮抗剂，在心梗后的低表达进一步加剧了心衰的形成，其改变与血管紧张素II高表达相一致。心室重构包括心肌细胞的重构和心肌间质的胶原沉积和纤维化。那么，除AngII升高外，炎症因子对Activin A-FS表达和对心肌成纤维细胞分泌的影响是我们深入探讨心肌间质纤维化机制的内容之一。我们应用的方法是应用结扎左冠前降支的方法建立心肌梗死后心衰大鼠模型，体外培养原代大鼠心肌成纤维细胞，MTT法检测炎症因子细菌内毒素LPS对心肌成纤维细胞增殖的影响；进一步用免疫细胞化学染色显示大鼠心肌成纤维细胞是否可以表达activin A与FS蛋白，以及加入LPS刺激对原代培养大鼠心肌成纤维细胞分泌activin A及FS的影响；我们进一步通过实时定量PCR检测用不同浓度的activin A作用大鼠心肌成纤维细胞24小时，检测胶原蛋白I和III的mRNA表达水平，以及大鼠心肌成纤维细胞activinβA、FS和iNOS（一氧化氮合成酶） mRNA表达的变化。应用的统计学方法：数据应用均数±标准差表示.不同组间的比较应用ANOVA软件的Dunnett post hoc test检验方法.百分数变化的数据应用theKruskal-Wallis H-test方法检验. P <0.05为有显著的统计学意义。1、LPS对心肌成纤维细胞增殖的影响心肌成纤维细胞增生是导致心肌重构的重要因素，本研究为明确炎症介质LPS对心肌成纤维细胞增殖的影响，我们培养原代大鼠心肌成纤维细胞，用不同浓度LPS刺激心肌成纤维细胞24小时，MTT法测细胞增殖，结果发现LPS能明显刺激心肌成纤维细胞增殖，与培养液对照组比较差异显著（P<0.01），且呈剂量依赖性。上述结果提示LPS可能促进心肌重构。2、Activin A和FS在心肌成纤维细胞中的表达（ELISA和PCR）首先我们采用免疫细胞化学染色明确心肌成纤维细胞是否可表达Activin A and FS，结果发现原代培养的心肌成纤维细胞表达activin A和FS成熟蛋白。进一步采用LPS刺激体外原代培养心肌成纤维细胞，分析activinA和FS表达水平变化。心肌成纤维细胞在致炎因子LPS作用下activin A分泌水平明显增加，与培养液对照组比较差异显著（P<0.01）；而FS表达水平则降低，与培养液对照组比较差异显著（P<0.01），导致ACT/FS比值升高；activinA的mRNA表达水平明显增加，与培养液对照组比较差异显著（P<0.01）；然而，FS的mRNA表达水则与培养液对照组无明显差异（P﹥0.01）。FS蛋白表达水平与基因表达水平不符，推测蛋白水平降低可能是由于其与activinA结合所致。上述结果提示LPS作用于心肌成纤维细胞后可导致ActivinA and FS系统失衡，以activinA升高为主。3、Activin A促进心肌成纤维细胞增殖为进一步明确高表达的activinA对心肌成纤维细胞的作用，我们用不同浓度的activinA作用于心肌成纤维细胞24h，MTT法检测细胞增殖，结果发现activinA能明显刺激心肌成纤维细胞增殖，与培养液对照组比较差异显著（P<0.01），且呈剂量依赖性。上述结果提示activin A可能参与心肌重构病理进程，而LPS的促心肌成纤维细胞增殖作用可能是通过其刺激心肌成纤维细胞高表达activinA实现的。4、Activin A刺激心肌成纤维细胞胶原合成心肌细胞间质由两种重要的成分组成，胶原蛋白I和III,它们在心肌重构上起着重要的作用。为明确activinA对心肌纤维化的影响，我们进一步用不同浓度的activinA作用心肌成纤维细胞24h，检测胶原蛋白I和III的mRNA表达水平，结果发现activin A可明显促进胶原蛋白I和III的mRNA表达，与培养液对照组比较差异显著（P<0.01），且呈剂量依赖性。上述结果提示activin A可能通过刺激心肌成纤维细胞表达胶原蛋白I和III，导致细胞间质重构，进而促进心肌重构。5、Activin A刺激心肌成纤维细胞后NO和eNOS的表达水平我们前期研究显示ActivinA不但参与心肌的纤维化，同时也具有促进炎症介质NO分泌作用，因此，为了确定ActivinA可能进一步通过刺激炎症介质NO分泌参与心肌重构病理过程，实验采用ActivinA刺激心肌成纤维细胞，结果显示，ActivinA能明显刺激心肌成纤维细胞分泌NO及iNOSmRNA的高表达，与培养液对照组比较差异显著（P<0.01）。上述结果提示Activin A可能以自分泌/旁分泌形式作用于心肌成纤维细胞，通过刺激NO合成与分泌，进一步参与心肌重构的病理过程。结论是炎症介质LPS可促进心肌成纤维细胞activinA与FS表达失衡，以activinA高表达为主；高表达的activinA通过自分泌/旁分泌（NO）方式促进成纤维细胞增殖及分泌胶原蛋白，参与心肌纤维化病理过程。心衰时心肌间质的重构在心衰的发展进程中有不可忽视的作用。Activin A-FS系统不再是以前认为的性调节激素，在心衰的发生发展过程中Activin A-FS系统失衡，以Activin A升高为主，高表达的Activin A可能是导致心肌纤维化并最终诱发心衰的主要因素。FS作为Activin A拮抗剂，低表达状态进一步加剧了心衰的形成。而炎症因子又是Activin A-FS系统失衡的重要诱导因素，因此，深入研究心衰综合性的防治措施包括抗炎、拮抗细胞因子、免疫调节和发挥他汀多效性作用将有重要的意义，调节Activin A与FS表达比例有望成为改善心衰的又一治疗靶点。