慢病毒介导的CBS基因过表达对原代神经元APP/Aβ与BACE-1代谢的影响

来源 :重庆医科大学 重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yifanjiawei
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目的通过基因过表达方法上调胱硫醚β-合成酶(Cystathionine-β-synthase,CBS)在原代皮质与海马神经元细胞中表达,观察其对原代神经元淀粉样前体蛋白/β-位淀粉样蛋白(APP/Aβ)与BACE-1代谢的影响。方法使用过表达CBS慢病毒载体感染体外培养的原代皮质神经元,设定为慢病毒介导阳性(CBS)组、另设阴性对照慢病毒感染(NC)组、未经慢病毒感染(CON)组。采用实时荧光定量PCR检测CBS基因mRNA的表达,Western blot分别检测CBS、APP与BACE-1蛋白的表达,采用Elisa检测Aβ40的分泌水平。结果使用过表达CBS的慢病毒载体感染体外培养的神经元,实时荧光定量PCR检测其mRNA的表达上调明显升高,与NC组和CON相比差异有统计学意义(P<0.05), Western blot结果显示CBS蛋白表达升高与定量PCR一致,Western blot检测APP与BACE-1蛋白表达下降(P<0.05),Elisa检测感染72小时后神经元Aβ40分泌水平明显降低(P<0.05)结论慢病毒载体介导的CBS基因过表达可降低原代皮质与海马神经元APP、BACE-1蛋白的表达及Aβ40分泌水平。
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