【摘 要】
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目的研究成熟卵泡与未成熟卵泡中促卵泡刺激素受体(FSHR)及干细胞因子(SCF)的表达情况,探究颗粒细胞中FSHR及SCF的表达与卵泡成熟是否有关;研究不同浓度的重组促卵泡刺激素(r
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目的研究成熟卵泡与未成熟卵泡中促卵泡刺激素受体(FSHR)及干细胞因子(SCF)的表达情况,探究颗粒细胞中FSHR及SCF的表达与卵泡成熟是否有关;研究不同浓度的重组促卵泡刺激素(rFSH)对体外培养的人卵巢颗粒细胞的SCF信使RNA(mRNA)及蛋白表达是否有影响;探讨人卵巢颗粒细胞中促卵泡刺激素调节干细胞因子分泌的机制。方法实验性研究。收集行卵胞浆内单精子显微注射技术(ICSI)患者(均为输卵管因素或男方因素)的颗粒细胞,以成熟卵泡及未成熟卵泡来源分组,分别检测两组颗粒细胞中FSHR及SCF的表达情况;对行体外受精-胚胎移植技术(IVF-ET)后的卵泡液来源的颗粒细胞进行不同浓度的rFSH(果纳芬;10IU/L,25 IU/L,50 IU/L,100 IU/L,200IU/L)干预培养,与空白对照组(正常培养)一同检测FSHR及SCF的表达情况;用含有rFSH、环磷酸腺苷激动剂(cAMP)及PKA抑制剂(H-89)的培养基培养IVF卵泡液来源的颗粒细胞,将细胞分为6组:空白对照组,rFSH单独培养组,H-89单独培养组,cAMP单独培养组,H-89联合cAMP培养组,H-89联合rFSH培养组。用Real-time PCR,细胞免疫荧光技术及Western blot检测人颗粒细胞中FSHR及SCF的蛋白和mRNA水平。结果未成熟卵泡来源的颗粒细胞中的FSHR及SCF的表达比成熟卵泡来源颗粒细胞中较低;用不同剂量的rFSH干预培养颗粒细胞后,FSHR及SCF mRNA及蛋白呈现浓度依赖性升高而后降低;FSH可能通过cAMP/PKA途径影响颗粒细胞中SCF的mRNA及蛋白分泌。结论在人卵巢颗粒细胞中,FSH可能通过上调FSHR表达,激活cAMP/PKA信号传导通路,从而增加SCF分泌进一步促进卵泡及卵母细胞的发育成熟。
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